血细胞分析仪分解课件.ppt

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1、血液分析仪HematologicAnalyzers赣南医学院第一临床医学院医学检验教研室fl100200300400教学安排了解血细胞分析仪的发展过程熟悉血细胞分析仪的工作原理熟悉血细胞分析仪的类型熟悉血细胞分析仪各项参数的应用熟悉血细胞分析仪的质量控制血液分析仪临床血液一般检查最常用仪器。50年代，美国库尔特（W.H.Coulter）发明电子血细胞计数仪并申请专利。1912年出生在美国阿肯色州,1948年他在芝加哥一间地下室建立了自己的实验室,并发现库尔特原理，1953年获得美国发明专利。血细胞分析仪的发展1、自动化程度越来越高2、提供参数越来越多3、精密度越来越高4

2、、速度越来越快5、越来越注重环保6、质控功能得到加强7、智能化程度越来越高血液分析仪优势检测项目多速度快精度高易操作血细胞分析仪的原理血液分析仪的原理仪器基本结构1、机械系统2、电学系统3、光学系统（一）血液分析仪电学检测原理1、电阻抗检测原理脉冲信号传递步骤1、放大：通过电子放大器，将微伏讯号放大为脉冲讯号；2、阈值调节：调节参考电平的大小；3、甄别：根据阈值调节器提供的参考电平，去掉假信号，提高准确性；脉冲信号传递步骤4、整形：将放大的甄别后不一致的细胞讯号波形形成标准的平顶波；5、计数：送入计数系统，以细胞大小为横座标，以纵座标表示体积相对频率，绘制直方图。甄别红

3、细胞、白细胞、血小板直径不同，产生的脉冲幅度也不同，以白细胞最大，红细胞次之，血小板最小。先利用脉冲幅度甄别器将幅度较小的血小板脉冲去掉，保留红细胞和白细胞脉冲。因为白细胞数量小于红细胞数量的1／500，故其总数即可代表红细胞数量。甄别在计数白细胞时，先利用溶血剂将红细胞破碎，然后再对剩下的白细胞进行计数。在计数血小板时，将脉冲幅度甄别器的域值调低，计出红细胞、白细胞和血小板的总数，再减去先前测出的红细胞数，便得出血小板数。2.射频电导检测原理高频电磁波可通过细胞膜，利用高频电磁探针渗入细胞膜脂质层，测定细胞的导电性，提供细胞内部化学成分、胞核、颗粒等信息，以区别大小相

4、当但内部结构不一致的细胞或颗粒。3、流式细胞术加光学检测原理利用流式细胞术使单个细胞随着流体动力聚集的鞘流液在通过激光照射的检测区时，使光束发生折射、衍射和散射，散射光由光检测器接受后产生脉冲，脉冲大小与被照细胞的大小成正比，数量代表了细胞的数量。光散射法血液分析仪检测原理组合应用电学光学细胞化学等在细胞分类的过程中，激光散射法较电阻抗法更准确。4.分光光度检测原理主要用于血红蛋白测定。使用含有溶血剂的稀释液，使红细胞溶解并释放出血红蛋白，血红蛋白再与溶血剂中的某些成分结合，形成稳定的血红蛋白衍生物，于特定波长内比色，根据吸光度得到血红蛋白浓度。（二）血液分析仪检测原理

5、的应用1、电阻抗法2、体积、电导、光散射白细胞分类法3、阻抗与射频、荧光染色技术联合白细胞分类法4、光散射与细胞化学技术联合白细胞分类计数5、多角度偏振光散射白细胞分类技术1、电阻抗法检测原理仪器将体积为35～450fL的血细胞，分为256个通道（channel）。根据细胞大小，分别置于不同的通道中，显示血细胞体积分布直方图(Histogram)。根据细胞大小将白细胞初步分为三个细胞群。第一群（35～90fl）小细胞区：淋巴细胞（体积最小）。第二群（90～160fl）单个核细胞区，（中间细胞）：单核细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞、原始、幼稚细胞、异常细胞等。第三群（1

6、60fl以上）大细胞区：嗜中性粒细胞（体积最大）。三分群血液分析仪正常白细胞分类模式图（直方图）%3590160300400450(fl)2、体积、电导、光散射法volumeconductivityscatter,VCS原理细胞体积技术（测量细胞大小）电导性技术（测量细胞内部结构）光散射技术（测量细胞形态、细胞核和细胞颗粒）。VCS检测八千多个白细胞逐个、直接、同时地在流式通道内接受VCS三重检测，得到各自的三维座标值VCSVCS可显示3种细胞散点图DF1（体积值和散射光值）DF2（体积值和电导值）DF3（体积值和电导值）WBC分类散点图上的报警区域Fluorescen

7、ceSideScatterBlasts/AtypicalLymphImmatureGranMonoLymphEOLeftShiftNeutNRBC3、电阻抗与射频法（能透入细胞内，测量核的大小及颗粒的多少）DC:直流电细胞大小的信息RF:射频电流细胞内部结构信息聚亚早基蓝核酸荧光染料进入白细胞内，使DNARNA和细胞器着色，荧光强度代表了不同成熟度的细胞，三者联合得到4DIFF白细胞散点图。嗜碱性粒细胞则使用专门检测通道，嗜碱性溶血剂仅使嗜碱性粒细胞保持形态，经流式细胞术计数。过氧化物酶检测通道嗜碱性粒细胞/分叶核检测通道。4、激光与细