结核分枝杆菌最新检测技术课件.ppt

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时间:2020-07-22

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1、结核分歧杆菌检测新技术——结核菌分泌蛋白抗原快速检测我国流行概况是全球22结核病高负担国家之一活动性肺结核病人数居世界第二,仅次于印度是我国重点控制疾病之一目前估算全国活动性肺结核病人450多万,每年新发传染性肺结核患者150多万全国约45%的人受过结核菌的感染,明显高于全球水平2014年全国法定法定传染病发病率煤矿行业结核比率据北京京煤集团总医院结核病科孔冬青主任调查,肺结核科住院治疗的611例煤工尘肺合并肺结核患者,经筛查,检出痰菌阳性223例。即三分之一的人均患有肺结核。该数据逐年递增。危害WHO对结核个案定义疑似结核个案有呈现结

2、核病征与症状(低烧、全身乏力或消瘦、夜间盗汗、女性可导致月经不调或停经)长期咳嗽超过2周确诊结核个案结核菌培养阳性的病人不能有例行培养结核菌的国家,痰涂片耐酸染色结果两次都呈阳性,亦可考虑为确诊病人一般临床结核检测方法1.结核的常规检测2.Y-干扰素检测技术3.T-SPOT.TB检测技术4.GeneXpert检测技术1.常规检测检测2.Y-干扰素原理:利用T细胞对结核菌的记憶,加入结核菌抗原,产生干扰素的多寡.判定是否为潜伏感染者.缺点检测标本:血液(目前WTO已禁止使用血液标本检测)收费标准:500-800元适用于高危险人群检测.不宜

3、用于普查.操作复雜.需要专业人员及设备.3.T-SPOT.TB(体外酶联免疫斑点技术)缺点操作复杂繁琐收费价格:500-800元三甲大型实验室操作4.GeneXpert检测技术原理:分子生物检测技术缺点目前普及范围小收费标准:约500元配合仪器使用,仪器需约100万元检出率低、费用低检出率高、费用高费用低、检出率高结核检测新技术——结核菌分泌蛋白抗原快速检测试剂结核菌分泌蛋白抗原快速检测试剂(胶体金法)是利用重组基因的技术制造结核菌的特异性蛋白(抗体),纯化后包被吸附于胶体金上,检测时,当样品有结核菌分泌性蛋白时,先和包被的胶体金标记物

4、结合,产生反应。由于层析作用,其反应复合物会沿着硝酸纤维膜向前移动。原理81%敏感性85.9%特异性痰液检测结核杆菌染色与TB抗原快速检测试剂之比较痰液耐酸性染色結核分枝桿菌+非結核分枝桿菌+培養確認固態觀看PCR全自動化培養儀結核分枝桿菌+非結核分枝桿菌-痰液(未經處理)結核分枝桿菌+非結核分枝桿菌-培養確認樣品緩衝液結核分枝桿菌+非結核分枝桿菌-濟南杏恩結核菌檢測試劑盒濟南杏恩結核菌檢測試劑盒結核菌快速金標檢測試劑盒簡易操作步驟优势检测结核菌分枝杆菌之特异性分泌性抗原(Secretedspecificprotein)可取代耐酸染色无

5、法区别分枝(MTB)或非分枝结核(NTM)杆菌之困扰.取代现行的非特异性纯化蛋白抗原(PPD,purifiedproteinderivative).无交叉反应,故也适用于BCG接种的病人或感染非结核之病人.高特异性及敏感度.(>80%)可做非肺部结核病检验建立一个快速且精确的检验方法(5-15分钟判读结果)广泛用于一般人群普查(早期诊断,早期治疗)可做为培养确认试剂是否为结核分枝杆菌(MTB)或非结核分枝杆菌(NTM)之区别评价结核临床疗效及治疗方案定位:筛查优势注意事項服药治疗的结核病人,可能会因为药物抑制蛋白分泌,所以成阴性結果.若

6、是药物治疗的結核病人,进行疗程中追踪检测,成阳性反应.应考虑可能为抗药性病患.对于痰液的检测,必須使用未处理的原痰,加入试剂盒中的样品缓冲液后方可检测.若是使用高浓度及高碱性的NaOH软化痰液,则将破坏试纸条中的包被抗体和胶体金,导致错误結果.试剂盒中的样品缓冲液可以破坏菌体的蛋白酶,使菌体失活,但是不影响试验結果及检测.胶体金免疫数字测试卡HR201全自动金标分析仪特点:定性和模拟定量检测触控界面、操作简单体积小、便于携带快速精确(10秒出判读结果)数据储存量大内置热敏打印机可实时打印检测结果支持LIS系统谢谢!

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