资源描述：
《行业标准：GB 8381-87 饲料中黄曲霉素B1的测定方法.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、中华人民共和国国家标准UDC636.085,543.062饲料中黄曲霉素B:的测定方法GB8381一87ThemethodofdeterminationofaflatoxinB,infeedstuff本标准参照采用国际标准ISO6651-1983(E)《饲料中黄曲霉素B，的测定方法》。1适用范围本标准适用于各种单一饲料和配合饲料。2原理样品中黄曲霉素B,经提取、柱层析、洗脱、浓缩、薄层分离后在波长365nm紫外灯光下产生蓝紫色荧光，根据其在薄层上显示荧光的最低检出量来测定含量。3试剂31三氯甲烷(GB682-78),32正己烷(HG
2、3-1003-76).3.5甲醉(GB683-79),5.4苯(GB690-77),抓乙睛(HGB3329-60)。36无水乙醚或乙醚经无水硫酸钠脱水(HGB1002-76),37丙酮(GB686-78)以上试剂于试验时先进行一次试剂空白试验，如不干扰测定即可使用。否则需逐一检查进行重蒸。3.8苯一乙腋混合液:量取98ml,苯，加2mL乙睛混匀。3.9三氯甲烷一甲醇混合液:取97ml,三抓甲烷，3ml,甲醉混匀。3.10硅胶:柱层析用80200目。3.11硅胶G;薄层色谱用。3.12三氟乙酸。3.13无水硫酸钠(HG3-123-76
3、),3.14硅藻土。3.15黄曲霉毒素B，标准溶液3.15.1仪器校正:测定重铬酸钾溶液的摩尔消光系数，以求出使用仪器的校正因素:精密称取25mg经千燥的重铬酸钾(基准级)。用。.009mol/L硫酸溶解后准确稀释至200ml,(相当于0.0004mol/L的溶液)再吸取25ml.此稀释液于50ml,容量瓶中，加。.009mol/L硫酸稀释至刻度(相当于0.0002mol/L溶液)。再吸取25mL此稀释液于50ml.容量瓶中，力J0.009mol/L硫酸稀释至刻度(相当于0.0001mol/L溶液)。用lcm石英杯，在最大吸收峰的波
4、长处(接近350nm)用0.009mo1/L硫酸作空白，测得以上三种不同浓度的摩尔溶液的吸光度。并按下式计算出以上三种浓度的摩尔消光系数的平中华人民共和国农牧渔业部1987一11一20批准1988一12一01实施GB8381一87均值。F.=二式中:F=一一重铬酸钾溶液的摩尔消光系数;A一测得重铬酸钾溶液的吸光度;”一一重铬酸钾溶液的摩尔浓度再以此平均值与重铬酸钾的摩尔消光系数值3160比较，按下式求出使用仪器的校正因素。了-31M60·(2)式中:f-一使用仪器的校正因素;M-一测得重铬酸钾摩尔消光系数平均值。若f大于。.95或小
5、于1.05，则使用仪器的校正因素可略而不计。3.15.210pg/mL黄曲霉毒素B、标准溶液的制备:精密称取1mg-1.2mg黄曲霉毒素B,标准品，先加入2mL的乙睛溶解后，再用苯稀释至100mL,置于4℃冰箱保存。用紫外分光光度计Mail此标准溶液的最大吸收峰的波长及该迪长的吸光度值，并按下式计算该标准溶液的浓度。X,=AXMXE1,000Xf式中X,一黄曲霉毒素B标准溶液的浓度，pg/mL;A一一测得的吸光度值;M一一黄曲霉毒素B，的分子量,312;F.，一一黄曲霉毒素B，在苯一乙睛棍合液中的摩尔消光系数，19800,根据计算，
6、用苯一乙睛混合液调到标准液浓度恰为10pg/mL，并用分光光度计核对其浓度3.15.3纯度的测定:取5pL10!,哪mL黄曲霉毒素B.标准溶液滴加于涂层厚度0.25mm的硅胶G用甲醇一氯仿(4:96)与丙酮:氯仿(8:92)展开剂展开，在紫外光灯下观察荧光的产生，必薄层板上。须符合以下条件:a.在展开后，只有单一的荧光点，无其他杂质荧光点。6.原点上没有任何残留的荧光物质3.16黄曲霉毒素B，标准使用液:精密吸取1mL10pg/mL标准溶液于]10mL容量瓶中，加苯一乙睛混合液至刻度，混匀，此溶液每毫升相当于1pg黄曲霉毒素B,。吸
7、取1.0mL此稀释液置于5mL容量瓶中.加苯乙睛混合液稀释至刻度此溶液每毫升相当于0.2Ng黄曲霉毒素B,。另吸取1.0mL此液置于5mL容量瓶中，加苯一乙睛混合液稀释至刻度。此溶液每毫升相当于0.04ug黄曲霉毒素B,.3.17次氯酸钠溶液(消毒用):取100g漂白粉，加入500mL水，搅拌均匀。另将80g工业用碳酸钠(Na,CO,"IOH,O)溶于500mL温水中，再将两液混合，搅拌、澄清后过滤。此滤液含次氯酸钠浓度约为2.5%,若用漂白粉精制备则碳酸钠的量可以加倍。所得溶液的浓度约为5%，污染的玻璃仪器用l%次氯酸钠溶液浸泡半
8、天或用5%次氯酸钠溶液浸泡片刻后即可达到去毒效果口4仪器东1小型粉碎机。4.2分样筛一套4.3电动振荡器。4.4层析管内径22mm，长300mm下带活塞，上有贮液器45玻璃板:5x2。cm4.6傅层板涂布器{(川GB8381一874.
