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《行业标准：GB 5009.277-2016 食品安全国家标准 食品中双乙酸钠的测定.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、中华人民共和国国家标准GB5009.277—2016食品安全国家标准食品中双乙酸钠的测定2016-12-23发布2017-06-23实施中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会发布国家食品药品监督管理总局GB5009.277—2016前言本标准代替GB/T23383—2009《食品中双乙酸钠的测定高效液相色谱法》。本标准与GB/T23383—2009相比,主要变化如下:———标准名称修改为“食品安全国家标准食品中双乙酸钠的测定”;———修改了标准的适用范围。ⅠGB5009.277—2016食品安全国家标准食品中双乙酸钠的测定1范围本标准规定了食品中双乙酸钠的液相色谱测定
2、方法。本标准适用于豆干类、豆干再制品、原粮、粉圆、糕点、预制肉制品、熟肉制品、熟制水产品(可直接食用)、固体复合调味料、膨化食品中双乙酸钠的测定。本标准不适用于调味品、液体复合调味料及添加过乙酸的食品的测定。2原理试样中双乙酸钠酸化后转化为乙酸,经超声波水浴提取或水蒸气蒸馏,收集后调pH,经高效液相色谱测定,外标法定量。3试剂和材料除非另有说明,本方法所用试剂均为分析纯,色谱用水为GB/T6682规定的一级水,其他用水为GB/T6682规定的三级水。3.1试剂3.1.1磷酸(H3PO4)。3.1.2磷酸氢二铵[(NH4)2HPO4]。3.1.3硅油[(C2H6OSi)
3、n]。3.2试剂配制3.2.1磷酸溶液(1mol/L):在500mL水中加入53.5mL磷酸,混匀后加水定容至1000mL。3.2.2磷酸氢二铵溶液(1.5g/L):称取磷酸氢二铵1.5g,加水溶解定容至1000mL。3.3标准品双乙酸钠标准品[(CH3COO)2HNa,CAS号:126-96-5]:纯度≥99%。3.4标准溶液配制3.4.1标准储备液(10mg/mL):准确称取双乙酸钠标准品1g(精确至0.0001g),用水定容至100mL。该标准储备液置于0℃~4℃冰箱内保存,保存期为3个月。3.4.2标准工作液:准确吸取5.0mL标准储备液于50mL容量瓶中,用
4、水稀释至刻度,配制成浓度为1.0mg/mL标准工作液。该标准工作液置于0℃~4℃冰箱内保存,保存期为1个月。4仪器和设备4.1高效液相色谱(HPLC)仪:配有紫外检测器或二极管阵列检测器。1GB5009.277—20164.2分析天平:感量为0.0001g和0.01g。4.3组织捣碎机。4.4水蒸气蒸馏装置:500mL。4.5离心机:转速≥4000r/min。4.6具塞塑料离心管:50mL。4.7超声波清洗器。4.8pH计。4.90.45μm水相微孔滤膜。4.10精密pH试纸:pH0.5~5.0。5分析步骤5.1试样制备固体样品取500g,经组织捣碎机捣碎混匀后备用;
5、液体样品摇匀后备用。5.2试样处理5.2.1蒸馏法准确称取25g(精确至0.01g)试样,置于500mL蒸馏瓶中,加入100mL水,再用50mL水冲洗容器,转移到蒸馏瓶中,加磷酸溶液(1mol/L)20mL,2滴~3滴硅油,进行水蒸气蒸馏,将250mL容量瓶置于冰浴中作为吸收液接收装置,待蒸馏约240mL时取出,在室温下放置30min,用1mol/L磷酸溶液调pH为3左右,加水定容,摇匀,经0.45μm水相微孔滤膜过滤后,供液相色谱测定。5.2.2直接浸提法(仅适用于馒头、花卷)准确称取5g(精确至0.01g)试样至100mL烧杯中,加水20mL,加入1mol/L磷酸
6、溶液0.5mL,混匀,经超声浸提10min后,用磷酸溶液(1mol/L)调pH为3左右,转移试样至50mL容量瓶中,用水定容至刻度,摇匀。将试样全部转移至50mL具塞塑料离心管中,以不低于4000r/min离心10min,取上清液,经0.45μm水相微孔滤膜过滤后,供液相色谱测定。5.3仪器参考条件a)色谱柱:C18柱,柱长250mm,内径4.6mm,粒径5μm,或等效色谱柱;b)柱温:25℃;c)流动相:用磷酸溶液(1mol/L)调节磷酸氢二铵溶液(1.5g/L)pH为2.7~3.5(临用现配),经0.45μm水相微孔滤膜过滤;d)流速:1.0mL/min;e)波长
7、:214nm;f)进样量:20μL;g)色谱柱清洗参考条件:试验结束后,用10%甲醇清洗1h,再用100%甲醇清洗1h。5.4标准曲线的制作5.4.1蒸馏法准确吸取双乙酸钠标准储备液1.0mL、2.5mL、5.0mL、7.5mL、10.0mL、12.5mL置于500mL2GB5009.277—2016蒸馏瓶中,其他操作同5.2.1,其双乙酸钠标准溶液最终浓度分别为0.04mg/mL、0.1mg/mL、0.2mg/mL、0.3mg/mL、0.4mg/mL、0.5mg/mL,经0.45μm水相微孔滤膜过滤后分别注入液相色谱仪中,测定相应的峰面积,以标准工
