行业标准：DB37T 3852-2019 银杏培育指南 组培育苗.pdf

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1、ICS65.020.01B05DB37山东省地方标准DB37/T3852—2019银杏培育指南组培育苗GuidebookforGinkgobilobacultivation—Tissuecultureforseedlings2019-12-31发布2020-01-31实施山东省市场监督管理局发布DB37/T3852—2019前言本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。本标准由山东省自然资源厅提出并组织实施。本标准由山东省林业标准化技术委员会归口。本标准起草单位：山东农业大学、山东省林木种质

2、资源中心。本标准主要起草人：孙霞、邢世岩、单超、鲁仪增、孙立民、门晓妍、张谦、曹钟允、许楠、李影、董遥、倪召欣。IDB37/T3852—2019银杏培育指南组培育苗1范围本标准规定了银杏组培育苗的外植体采集和消毒、培养基配制与保存、接种、瓶苗培养、炼苗与移栽、质量标准、商品苗包装、运输和档案管理等技术要求。本标准适用于银杏的组培育苗。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本

3、文件。GB/T6001育苗技术规程LY/T1882林木组织培养育苗技术规程3外植体采集和消毒3.1外植体采集外植体主要包括茎尖、茎段和胚。选取1～2年生生长健壮、具有品种典型性状的优良单株，取幼苗外围当年生幼嫩枝条，采集时间在3～4月；胚取当年种仁，种子采集时间为10月上中旬，沙藏贮存70d～90d。种核除去外种皮、中种皮和内种皮，分离出种胚。3.2外植体消毒3.2.1茎尖和茎段茎尖和茎段剪去叶片，用肥皂水擦洗，然后用自来水冲洗干净，无菌操作台下依次用70%酒精消毒30s，含有吐温20的0.1%氯化

4、汞消毒8min～10min，无菌水冲洗3～5次，然后用无菌滤纸吸去茎尖和茎段表面的水分。3.2.2种胚种胚先用肥皂水擦洗，然后用自来水冲洗干净，无菌操作台下依次用70%酒精消毒30s，含有吐温20的0.1%氯化汞消毒6min～8min，无菌水冲洗3～5次，然后用无菌滤纸吸去种胚表面的水分。3.3外植体制备3.3.1茎尖和茎段在无菌环境下，剪取0.5cm～1.0cm长的茎尖或1cm～2cm长的茎段，每段留1～2个腋芽或顶芽，转入已消毒的培养皿中备用。3.3.2胚1DB37/T3852—2019将已消毒

5、的种胚，转入培养皿中备用。4培养基配制与保存培养基的配制与保存执行LY/T1882标准。5接种在无菌状态下，将培养皿中的外植体用镊子直插式接种于培养瓶中，每瓶接种2～3个。封口膜要及时捆绑，并将品种代号、培养基类型、个人编号以及接种日期标示在瓶上。6瓶苗培养6.1初代培养茎段外植体的初代培养使用芽诱导培养基，配方为MS+NAA0.2mg/L+6-BA1.5mg/L+0.20%AC；胚外植体的初代培养使用MS培养基，pH5.8～6.0。培养温度为25℃±2℃，置于1500lx～2000lx的光照条件下

6、培养10d～15d，光照8h/d～12h/d。6.2增殖培养外植体增殖3～5倍后，剪成1.0cm～2.0cm带芽小段，转入新的增殖培养基中。培养基配方为MS+NAA0.1～0.5mg/L+6-BA0.1～2.0mg/L+0.25%AC。培养条件同初代培养。增殖周期为30d～45d。6.3复壮继代培养8～10代后进行复壮。6.4生根培养选择生长健壮、叶色正常，高3cm～5cm的嫩茎接种于生根培养基中，培养基配方为1/2MS+IBA0.5mg/L。培养条件同初代培养。7炼苗与移栽7.1瓶苗炼苗选取有活力

7、，生长健壮，叶色正常，根数≥5条，根长≥0.8cm的组培苗，温室自然光闭口炼苗2～3周，开口炼苗5d～9d，温度保持25℃±3℃。7.2出瓶驯化洗净组培苗残留的培养基，移栽到无纺布容器中驯化。栽培基质采用细河沙+珍珠岩+草炭土，其体积比为1:1:2，使用前12h～24h用0.5%～0.7%的高锰酸钾消毒。驯化期间保持温度20℃～30℃，空气湿度70%～80%，光照强烈时可使用遮光度60%～70%的遮阳网遮阳。小苗长出新叶后，每7d～10d喷施叶面肥一次。7.3移栽2DB37/T3852—2019经过

8、25d～30d驯化即可移栽至大田。7.4苗期管理执行GB/T6001标准。8质量标准8.1组培苗质量标准苗木粗壮、挺直、有活力，具原品种特性。苗高3cm～5cm，叶片≥3片，大小协调、有层次感、色泽正常。根3～5条，根长适中，长势好。同一批次达标的组培苗在90%以上，且培养基无污染。8.2移栽苗的质量标准苗木健壮、挺拔，形态完整，具原品种特性。苗高5cm～10cm，地径≥0.2cm。叶片≥6片，大小协调，色泽正常。根系完整、发达。同一批次达标的组培苗在90%以上，无检