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1、本科毕业论文题目：NIX蛋白诱导PC12细胞自噬及其分子机制的初步研究姓名：海波学号：2010223243系别：检验医学院年级：2010级专业：医学检验指导老师：彤副主任检验师实习单位：军区总医院目录中文摘要3英文摘要3前言41材料与方法41.1试剂，材料和仪器41.1.1试剂41.1.1.1细胞培养试剂51.1.1.2质粒转染试剂51.1.1.3Westernbloting检测试剂51.1.1.4免疫荧光技术检测试剂51.1.2材料61.1.3仪器61.2研究对象61.3实验方法61.3.1PC12细胞的培养6
2、1.3.2pcDNA3.1(+)-N2-FLAG-NIX质粒瞬时转染71.3.3Westernblot检测质粒转染后相关蛋白表达71.3.4免疫荧光技术检测质粒转染后细胞中的自噬水平71.3.5数据统计分析82结果82.1Westernblot检测各组细胞中FLAG-NIX融合蛋白的表达情况92.2Westernblot检测各组细胞中LC3-I和LC3-II的表达情况102.3Westernblot检测各组细胞中Beclin-1的表达情况112.4Westernblot检测各组细胞中Uchl-1的表达情况122.
3、5Westernblot检测各组细胞中Hsc70的表达情况132.6荧光显微镜观察各组细胞中EGFP-LC3的表达情况143讨论15结论15参考文献15开题报告17致22NIX蛋白诱导PC12细胞自噬及其分子机制的初步研究摘要目的：研究NIX蛋白对PC12细胞自噬的诱导作用及其分子机制。方法：使用0.5、1、2、3μg浓度梯度的pcDNA3.1(+)-N2-FLAG-NIX质粒转染PC12细胞，Westernblot检测不同浓度梯度下各组PC12细胞中FLAG-NIX、LC3-I、LC3-II、Beclin-1、
4、Uchl1及Hsc70等蛋白的表达情况。同时，使用0.5、1、2、3μg浓度梯度的pcDNA3.1(+)-N2-FLAG-NIX质粒转染EGFP-LC3稳转PC12细胞，利用荧光显微镜观察各组细胞中EGFP-LC3重组蛋白表达情况。结果：随着pcDNA3.1(+)-N2-FLAG-NIX质粒转染浓度的增加，FLAG-NIX融合蛋白、LC3-II/LC3-I比值、Beclin-1蛋白呈梯度增长，Uchl1蛋白呈梯度减少，Hsc70蛋白没有明显变化，而EGFP-LC3重组蛋白的表达与LC3-II/LC3-I比值相一致
5、。结论：NIX蛋白可诱导PC12细胞自噬，其分子机制可能与LC3-II/LC3-I比值、Beclin-1蛋白和Uchl1蛋白有关。关键词：NIX；自噬；PC12细胞；过表达PreliminaryStudyonNIXinducedPC12cellautophagyandthemolecularmechanismsAbstractObjective：ToStudyonNIXinducedPC12cellautophagyandthemolecularmechanisms.Methods：Using0.5,1,2,an
6、d3μgconcentrationgradientpcDNA3.1(+)-N2-FLAG-NIXplasmidtransfectedwithPC12cells,WesternblotdetectionofdifferentconcentrationgradientsinPC12cellsforeachgroup,suchasLC3-I,LC3-II,Beclin-1,Uchl1andHsc70proteinexpression.Atthesametime,using0.5,1,2,and3μgconcentrat
7、iongradientpcDNA3.1(+)EGFP-LC3steadygo-N2-FLAG-NIXplasmidtransfectionofPC12cells,usingfluorescencemicroscopyEGFP-LC3recombinantproteinexpressionincellsofeachgroup.Results：AspcDNA3.1(+)transfectedwithincreasedconcentrationsof-N2-FLAG-NIXplasmid,FLAG-NIXfusionp
8、rotein,gradientratio,Beclin-1,LC3-II/LC3-Iproteingrowth,Uchl1gradientreduction,Hsc70proteinrecordedvirtuallynochange,andEGFP-LC3recombinantproteinexpressionconsistentwiththeratioLC3-II/LC
