DB32∕T 2736-2015 铁皮石斛无菌播种苗生产技术规程.pdf

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1、ICS65.020.20B31备案号：44814-2015DB32江苏省地方标准DB32/T2736-2015铁皮石斛无菌播种苗生产技术规程TechnicalcodeforproducingasepticseedlingsofDendrobiumofficinalekimuraetMigo2015-02-15发布2015-04-15实施江苏省质量技术监督局发布DB32/T2736-2015前言本标准按GB/T1.1-2009《标准化工作导则第1部分：标准的结构和编写》编制。本标准由苏州神元生物科技股份有限公司提出

2、。本标准起草单位：苏州神元生物科技股份有限公司、苏州市铁皮石斛研究院。本标准起草人：滕士元、史骥清、郭传敏、赵锋、时剑、孙贺、王译、侯森广、张琳琳。IDB32/T2736-2015铁皮石斛无菌播种苗生产技术规程1范围本标准规定了铁皮石斛无菌播种苗生产环境的消毒灭菌、培养基配制、培养条件调控、无菌播种苗生产工艺流程，以及商品苗的质量分级、包装、运输等。本标准适用于铁皮石斛无菌播种苗的生产。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。不注日期的引用文件，其最

3、新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。NY/T2306-2013花卉种苗组培快繁技术规程LY/T1882-2010林木组织培养育苗技术规程3术语和定义本标准采用下列定义。3.1铁皮石斛无菌播种苗asepticseedlingsofDendrobiumofficinalekimuraetMigo以铁皮石斛成熟蒴果的种子通过组织培养方法，在培养基上进行无菌播种、培养获得的种苗。3.2萌发培养cultureofgermination从种子播种，萌发出新叶的培养过程。3.3生长培养cultureofgrowth萌发培养

4、结束，将幼苗稀开转接至生长培养基，形成植株的培养过程。3.4生根培养cultureofrooting生长培养结束，将幼苗再一次稀开转接至生根培养基，形成根系，成为成品苗的培养过程。4生产场地与设备按照NY/T2306-2013中的规定执行。1DB32/T2736-20155容器和器械清洗容器采用650ml兰花组培瓶。清洗按照NY/T2306-2013中的规定执行。6培养基配制和贮存按照NY/T2306-2013和LY/T1882-2010中的规定进行。其中固化剂（琼脂等）可以采用粉末状，不需先加热溶化，和其它配制

5、溶液混合均匀，在分装机内定容后，pH调整至5.7~5.8。边均匀搅拌、边分装。7灭菌、接种、培养室操作按照NY/T2306-2013中的规定执行。8无菌播种苗生产流程8.1无菌播种苗生产流程图参见附录A。8.2蒴果的采集及处理8.2.1采集地选择采集地周围1km范围内应无其它种类石斛。8.2.2采收和保存经自然或人工授粉后，蒴果开始转黄时，选择饱满的果实连茎一起采收，采收后放于阴凉干燥处备用。8.2.3蒴果处理取完整的蒴果在超净工作台上切除果柄和花蒂，按照NY/T2306-2013中的规定执行灭菌。灭菌后的蒴果在

6、超净台上晾干，当天播种。8.3萌发培养将灭菌的蒴果，置于无菌滤纸上，在蒴果花蒂端切开一小口，用镊子夹住花柄端在培养瓶瓶口轻轻抖动，边抖动边转动培养瓶，将种子均匀地播撒于萌发培养基表面。一个蒴果接种5~8瓶。-2-1接种后的培养瓶放于培养室，前3d为暗培养，第4d始光照强度为14.4~18μmol·m·s，第7d后光照-2-1强度增加至27~36μmol·m·s，光照时间为12h/d；温度25±3℃；培养60~90d。8.4生长培养幼芽长至1~3mm时转接至生长培养基中进行培养，每瓶150~200株。-2-1转接后

7、的培养瓶放于培养室，光照强度为36~72μmol·m·s，光照时间为12h/d；温度为25±3℃；培养60~90d。8.5生根培养2DB32/T2736-2015幼苗长至1~1.5cm时转接至生根培养基中进行培养，每瓶20~40株。转接后的培养瓶放于培养室，培养条件同8.4。8.6标签每次接种后，将标注好播种日期、品种号、操作人工号等信息的标签贴于培养瓶上。8.7炼苗-2-1当幼苗长至3~5cm高时，将培养瓶放置于温室自然散射光下炼苗，光照强度为144~180μmol·m·s，温度25±5℃，炼苗7~15d，即可

8、进行销售或种植。9商品苗质量9.1质量要求商品苗应为非污染、无烂茎、烂根、黄叶；叶片4片以上，正常展开，叶色翠绿。650ml兰花组培瓶每瓶40-45株。9.2商品苗分级表1铁皮石斛商品苗分级根叶片株高茎粗等级（条）（片）（cm）（cm）一级苗3~5＞6≥5.0≥0.3二级苗2~34~6≥3≥0.210出售10.1包装铁皮石斛瓶苗直立放置在塑料筐或纸箱中，包装箱应该结实牢固