高中生物 专题二 微生物的培养与应用导学案新人教版选修1.doc

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1、生物技术实践专题2微生物的培养的应用考纲要求(1)微生物的分离和培养(2)某种微生物数量的测定(3)培养基对微生物的选择作用(4)利用微生物发酵来生产特定的产物以及微生物在其他方面的应用课题1微生物的实验室培养一、基础知识:(一)培养基概念:按照微生物对的不同需求,配制出供其的营养基质——培养基。成分:、、、无机盐有的有特殊要求:、特殊物质、氧气例如,培养乳酸杆菌加,培养霉菌PH性,细菌性或微性,培养厌氧微生物要(二)无菌技术1、无菌技术是围绕什么展开的?包括哪些方面?避免污染主要包括以下几个方面:(1)空间、衣着、手,和。(2)器皿、接

2、种用具和培养基等。(3)实验操作在酒精灯附近进行。(4)已灭菌的材料用具与周围物品。2、消毒和灭菌消毒:用较为的物理或化学方法物体表面或内部的微生物(不包括芽孢和孢子)。灭菌:用强烈的理化因素物体内外所的微生物,包括芽孢和孢子。【旁栏思考】1、无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外,还有什么目的?2、请你判断以下材料或用具是否需要消毒或灭菌。如果需要,请选择合适的方法。(1)培养基与培养(2)玻棒、试管、烧瓶和吸管(3)实验操作者的双手(1)、(2)需要;(3)需要。二、实验操作:用牛肉膏蛋白胨固体培养基进行大肠杆菌的纯

3、化培养。(一)制备牛肉膏蛋白胨固体培养基1、计算2、称量3、溶化4、灭菌:培养基放入锥形瓶,塞上棉花塞,包上牛皮纸,锅中灭菌培养皿用箱灭菌。5、倒平板:培养基冷却到℃左右,在酒精灯附近倒平板。2d后观察平板,无杂菌污染才可用来接种.1、培养基灭菌后,需冷却到50℃左右时,才能用来倒平板。你用什么办法来估计培养基的温度?用手触摸锥形瓶,刚刚时2、为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰?防止瓶口的污染3、平板冷凝后,为什么要将平板倒置?使更好挥发,防止皿盖上的水珠落入。4.在倒平板的过程中,如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位,这个平板还能用

4、来培养微生物吗?为什么?空气中的可能在皿盖与皿底之间的培养基上滋生,最好不用(二)纯化大肠杆菌微生物的接种方法:平板划线法:用接种环在固体培养基表面划线,将聚集的菌种逐步分散,分离到个细胞繁殖的个菌落.稀释涂布平板法:【问题讨论】1、为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环?在划线操作结束时,仍然需要灼烧接种环吗?为什么?第一步:每次划线前:结束时:2、在灼烧接种环之后,为什么要等其冷却后再进行划线?3、在作第二次以及其后的划线操作时,为什么总是从上一次划线的末端开始划线?使菌数随划线次数的增加而,得到个细菌繁殖而来的菌落。4、

5、涂布平板的所有操作都应在火焰附近进行。结合平板划线与系列稀释的无菌操作要求,想一想,第2步应如何进行无菌操作?各细节保证“”。如,酒精灯与培养皿的要合适、吸管头不要接触任何其他物体、吸管要在酒精灯火焰周围。三、结果分析评价1、未接种的培养基表面是否有菌落生长?如果有菌落生长说明了什么?2、在接种大肠杆菌的培养基上,你是否观察到独立的菌落?这些菌落的颜色、大小、形状相似么?3、培养12h和24h,观察到的实验结果相同吗?如果不同,请分析产生差异的原因。4、若在培养基中观察到不同形态的菌落,原因可能是什么?比较无土栽培植物组织培养微生物培养营

6、养成分无菌条件课题2土壤中分解尿素的细菌的分离与计数1、尿素能直接被植物吸收吗?。土中细菌将分解成才能2、土壤中的细菌为什么能利用尿素呢?能合成酶,反应式为:3、本课题的目的是什么呢?①从土壤中出能够分解尿素的细菌②每克土壤中分解尿素的细菌的数目一、研究思路:(一)筛选菌株:阅读资料回答:1、为什么Taq细菌能从热泉中被筛选出来呢?这对我们寻找目的菌株有何启示?原因:热泉温度高,淘汰不耐热的,选出的启示:寻找菌株,到相应的环境中去找。2、实验室中微生物的筛选原理是什么?用培养基3、分析本课题培养基配方,回答下列问题:KH2PO41.4gN

7、aH2PO42.1gMgSO4`7H2O0.2g葡萄糖10.0g尿素1.0g琼脂15.0g①在此培养基中哪些作为碳源、氮源?碳源:、氮源:②该培养基对微生物是否具有选择作用?如果有,是如何进行选择的?。氮源只有,只有能合成酶的微生物才能分解尿素得到氮源。③什么是选择培养基?只允许种类的微生物生长,同或其它种类微生物生长的培养基④怎样证明此培养基具有选择性呢?培养基类型土壤稀释液结果实验组对照组(二)统计菌落数目:1、测定样品中的微生物数量有哪些方法?①法(常用:稀释涂布平板法)②法(抽取调查法)2、稀释涂布平板法的原理是什么?稀释度足够高

8、时,个菌落,来源于一个活菌。数=数3、为了确保结果准确,一般选择菌落数是多少的平板计数?将几个稀释度下的菌液都涂布在平板上,选择菌落数~的平板计数。4、如何从平板上的菌落数推测每克样品中的菌落

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