解离常数kd与平衡解离常数KD的区别.doc

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1、解离常数kd与平衡解离常数KD的区别先来看动力学（Kinetics）与亲和力（Affinity）的区别。Kinetics可以告诉我们的信息：·Howfastdothingshappen?–Time-dependent·Association–howfastmoleculesbind·Dissociation–howfastcomplexesfallapart·KineticsdeterminewhetheracomplexformsordissociateswithinagiventimespanAffinity可以告诉我们的信息：·Howstrongisacomplex?–Tim

2、e-independent·Affinitydetermineshowmuchcomplexisformedatequilibrium(steadystatewhereassociationbalancesdissociation)下面总结解离常数kd与平衡解离常数KD的区别。1解离常数Kd不可能大于1，Kd的单位是S-1；2Kd表示单位时间内解离了的AB（即AB）占解离前初始AB的比例，由此可见Kd能表示解离反应的快慢，Kd越大代表解离越快，Kd越小代表解离越慢；3平衡解离常数KD=Kd/Ka，KD单位是M（mol/L）；4KD=[A][B]/[AB]，KD可以表示出处于平衡状态

3、时AB的解离程度，KD越大说明解离越多，代表AB之间亲和力越弱，KD越小说明解离越少，代表AB间亲和力越强；5根据KD，可以计算出AB发生解离的比例（百分比），反之亦可推导。如：解离百分比为20%，则KD=0.2*0.2/(1-0.2)=0.05(M)；再如KD=10-6M，则解离百分比约为0.1%。问题：Kd是否受配体，受体的浓度影响？怎样计算Kd?需要测多个浓度吗？答：Kd检测亲和力。在温度，PH值，盐浓度等影响亲和力的因素不变的情况下，Kd本身维持恒定，不受配体和受体浓度的影响。Kd等于一半的受体被配体结合是，配体的浓度。可以由公式推导：Kd=[A][B]/[AB],一半受体

4、（B）被被配体（A）结合时，[B]=[AB]，Kd=[A]。但是测量Kd的实际操作中，无需恰好使一半受体被配体结合。只需要测量[A]，[B]，[AB]三者的浓度即可计算出Kd。抗体亲合力的测定涉及抗体结合部位和抗原决定簇，因此要求抗体和抗原为液体的纯品。目前测定抗体亲和力的方法比较多，如平衡透析法、竞争结合法、荧光增强法、硫氰酸盐洗脱法、酶联免疫测定法(ELISA)和固相放射免疫测定法(SPRIA)等。其中ELISA法和SPRIA法是最敏感的检测方法，但其是否依赖抗体的亲和力尚存在争论.通常采用竞争结合及Scatchard作图法。McAb的亲和力通常为1×105～1×1012mol

5、-1。