透射电镜的原理与演示.ppt

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1、电子显微镜的原理与演示演示实验分辨力(resolution)：指显微镜能将近邻的两个质点分辨清楚的能力,通常是用相邻两点间的距离(D)来表示。一、电子显微镜出现的必然性光源的波长镜口率(N.A.)1.分辨力可见光波长为400~700nm(平均550nm)取决于镜口角和物镜与标本间介质的折射率波长：镜口率(N.A.)的大小：镜口角物镜与标本之间介质的折射率空气的折射率为1水为1.33香柏油为1.515-溴萘为1.66紫外光显微镜：0.1m光镜分辨力的最小数值：≤0.2m一般光镜设计的最大放大倍数为1,000~1,5

2、00光学分辨率的极限！有效放大：指本来用肉眼看不清楚的物体经显微镜放大成像后可以分辨清楚的放大指本来用肉眼能看清楚的物体经放大镜、幻灯机或投影仪等放大成像后可以分辨得更清楚的放大。无效放大：各种光与电子束的波长比较名称波长(nm)可见光760~390紫外光390~13X-射线13~0.05-射线1~0.005电子束100V0.12310,000V0.0122100,000V0.00387电子束的波长与发射电子束的电压平方根成反比：1V电子显微镜与光学显微镜的异同点1,000,0001,000放大倍数0.1nm0

3、.2~0.1m分辨力电聚焦机械聚焦聚焦方式电磁透镜光学透镜透镜真空空气介质短：0.003~0.008长：200~750波长(nm)电子束光束照射光电子显微镜光学显微镜2.电镜与光镜的对比电子显微镜与光学显微镜结构的对比图解二、电镜的分类根据电子束和样品之间作用方式的不同，可将电镜分为4大类:1)物体透射电子2)物体发射电子3)物体反射电子4)物体吸收电子透射电镜扫描电镜观察和分析样品的内部结构观察和分析样品的表面立体形貌三、透射式电子显微镜真空系统供电及保护系统电子照明系统成象系统观察记录系统1、透射电镜的结构电子照明

4、系统成象系统观察记录系统真空系统供电及保护系统透镜系统或电子光学系统透射电镜的结构一般电镜超高压电镜真空系统抽真空的意义：防止灯丝的氧化损伤；确保电子束在运行过程中的运动轨迹不受空气分子干扰；去除空气分子对样品的污染。1.310-12Pa离子泵真空涡流泵机械泵：油扩散泵：冷阱：真空管道、阀门、储气罐等1Pa1.310-5~10-6Pa;1.310-6Pa1.310-7~10-9Pa1.310-9Pa1.310-10Pa真空系统的组成部件：真空系统供电及保护系统的组成部件及其作用：供电及保护系统高电压低

5、电流的高压电源：产生高速电子低电压高电流的透镜电源：控制高速电子束的运动轨迹一般电镜均拥有两个电源：一旦电镜的某一部分发生故障,电镜的保护系统会让其自动紧急关机和断电,以免损伤电镜！稳压和稳流装置：保证电压和电流的高度稳定保护与控制系统：电子照明系统的组成部件及其作用：电子照明系统电子枪：产生高压电子束两级聚光镜：会聚高压电子束，以得到极细而均匀的电子束流第一聚光镜：将电子束的直径缩小20~60倍第二聚光镜：将电子束的直径扩大1~2倍第二聚光镜放大第一聚光镜缩小高压(V)高压电子束灯丝栅板阳极电子枪成象系统的组成部件及其

6、作用：成象系统样品室成像与放大装置冷阱样品放置室液氮罐金属导杆放大50倍放大3倍放大15倍放大200倍500,000倍物镜中间镜I中间镜II投影镜吸附样品室中的少量空气分子以提高真空度降低温度可防止电子的热漂移铜网样品观察记录系统的组成部件及其作用：观察记录系统注意：电镜照相与普通照相不同，图像的反衬度最低时才是正聚焦；且底片还必须要经过预干燥处理观察室放大镜照相装置透过样品的电子打到荧光屏上可显示出反映样品真实结构的图像保护眼睛荧光屏铅玻璃窗用于放大投到荧光屏上的图像电子形成的荧光图像衰减速度很快，一旦观察到理想的结构

7、图像就需要尽快照相2、透射电镜的成像原理获得高分辨率的图像：数百万倍使用电子枪发射出了波长极短的电子波利用电磁透镜可对电子束进行聚焦、放大和成像高速电子束透射样品电能转变成光能图像各处浓淡的不同真实反映了样品不同部位的物质结构高压电子枪高速电子束电磁透镜样品电子束发生投射荧光屏浓淡不同的图像成像原理：透射电镜照片演示微管蛋白的免疫荧光照片一个植物细胞的透射电镜照片图像各处浓淡的不同真实反映了样品中不同部位的物质结构透射电镜照片演示糙面内质网的透射电镜照片透射电镜照片演示多核糖体的透射电镜照片透射电镜照片演示玉米分散高尔基

8、体的透射电镜照片透射电镜照片演示线粒体的透射电镜照片叶绿体的透射电镜照片透射电镜照片演示细胞核的透射电镜照片有丝分裂器的透射电镜照片凋亡细胞正在杀肿瘤细胞的T细胞透射电镜照片演示-辅肌动蛋白热休克蛋白Hsp60笼形蛋白透射电镜照片演示金的原子布阵的透射电镜照片透射电镜照片演示T4噬菌体负染色的透射电镜照片图像各处浓