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时间:2020-06-05
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1、生物工程主要包括的内容:细胞工程基因工程发酵工程酶工程继代培养:由最初的外植体上下切下新增殖的组织,继续转入新的培养基上培养脱分化:以分化的细胞在一定因素作用下重新恢复分裂机能并改变原来的发展方向而沿着一条新的途径发育的过程植物细胞培养基的组成:无机营养物碳源和能源维生素生长因子氨基酸和有机添加物激素等培养基的制备:1水和药品2母液3ZnMnFeCopt等微量元素4高压灭菌和保存筛选细胞株的方法:1从已建立的愈伤组织中挑选出外观疏松生长快的浅色愈伤组织2用震荡或酶法游离出单个细胞或小细胞团3接种在固体培养基上培养两周4挑选出生长快的细胞株并继代培养5取各细
2、胞系的培养物进行有效成分的测定筛选出有效成分高而且生长快的细胞株常用的培养方法:组织块培养、单层细胞培养法、、组织块单层细胞培养法、血液培养、旋转管培养法、、悬浮细胞培养、微载体培养法单细胞制备的方法:机械法、酶法、愈伤组织诱导法细胞保存方法:低温、冷冻、继代细胞活力的测定:相差显微法、四唑盐还原法、FDA法、伊凡蓝染色法细胞团的计算方法:直接计算法、感光法分批培养方法:旋转培养、往返振荡培养、旋转振荡培养、搅动培养半连续培养法:特点可不断补充培养液中的营养成分,减少接种次数,使培养细胞所处环境与分批培养法一样随时间变化原生质体纯化的方法1沉降法2漂浮法3
3、沉降和漂浮法细胞的常规检测1细胞生长2细胞形态3营养液4微生物污染5细胞活性微生物原生质体融合的方法物理化学法细胞松弛素的生物效应:干扰细胞使分裂
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