高中生物选修三基因工程主要知识点.doc

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1、高中生物选修三基因工程主要知识点（1.1、1.2）一、基因工程：按照人们的意愿，进行严格的设计，并通过体外DNA重组和转基因等技术，赋予生物以新的遗传特性，从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。一、基因工程的三大工具：限制性核酸内切酶—“分子手术刀”；DNA连接酶—“分子缝合针”；基因进入受体细胞的载体—“分子运输车”。二、限制性核酸内切酶的特点：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且是每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键。三、限制酶识别序列的特点：反向对称，重复排列。四、限制酶在原核生物中的作用：切割外源DNA，

2、保护细菌细胞。五、为什么限制酶不剪切原核生物自身的DNA分子？原核生物本身不含相应特异性序列；对DNA分子进行甲基化修饰。六、两种常见的DNA连接酶：E·coliDNA连接酶：源自大肠杆菌，只连接黏性末端；T4DNA连接酶：提取自T4噬菌体，两种末端均可连接，连接平末端效率低。七、DNA连接酶和DNA聚合酶的相同点：都是蛋白质；都能生成3'磷酸二酯键。不同：前者在两个片段之间形成3'磷酸二酯键，后者只能将单个核苷酸连接到已有片段上；前者不需要模版，后者需要。八、载体需要满足的条件：有一到多个限制酶切点；对受体细胞无害；导入基因能在受体细胞内复制和

3、表达；有某些标记基因；分子大小合适。九、质粒：一种裸露的、结构简单、独立于细菌拟核DNA之外，并具有自我复制能力的很小的双链环状DNA分子。十、标记基因的作用：鉴别受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来。十一、三类载体：质粒；λ噬菌体的衍生物；动植物病毒。十二、获取目的基因的方法：说法一：从自然界已有的物种中分体（鸟枪法、反转录法）、用人工的方法合成；说法二：从基因文库中获取（鸟枪法、反转录法）、利用PCR技术合成、用化学方法人工合成。十三、基因库：一个物种中全部个体的全部基因的总和；基因文库：将含有某种生物不同基因的许多D

4、NA片段，导入受体菌的群体中储存，个个受体菌分别含有这种生物的不同的基因；基因组文库：含有某种生物全部基因的基因文库；部分基因文库：只含有一种生物部分基因的基因文库；cDNA文库：用某种生物发育的某个时期的mRNA反转录产生的多种互补DNA片段，与载体连接后储存在一个受体菌群中。十四、文库类型cDNA文库基因组文库文库大小小大启动子无有内含子无有基因多少某种生物的部分基因某种生物的全部基因物种间基因交流可以部分基因可以十五、人工合成目的基因的两个条件：基因比较小；核苷酸序列已知。十六、目的基因：主要是指编码蛋白质的基因，也可以使一些具有调控作用的

5、因子。一、启动子的特性：物种特异性、组织特异性、强弱差异。二、基因工程的步骤：目的基因获取、构建基因表达载体、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定。三、PCR的全称：多聚酶链式反应。四、PCR扩增目的基因的条件：dNTP、引物、Taq酶、DNA模版五、PCR技术扩增目的基因的过程：90-95℃，模版解旋；55-60℃，退火，引物与模版结合；70-75℃，Taq酶合成互补链。六、基因工程的核心：构建基因表达载体。七、构建基因表达载体的作用：使目的基因在受体细胞内能稳定存在，并遗传给下一代；使目的基因能表达和发挥作用。八、载体构成：插入基因、

6、启动子、终止子、标记基因、（复制原点）。九、T-DNA：　农杆菌Ti质粒中的一段DNA序列,可以从农杆菌中转移并稳定整合到植物核基因组中,常用于农杆菌转化法导入目的基因。十、倒入方法农杆菌转化法基因枪法花粉管通道法显微注射法钙离子处理法受体细胞双子叶植物、裸子植物单子叶植物开花植物动物微生物受体细胞类型体细胞体细胞受精卵卵细胞体细胞十一、基因工程常利用微生物的原因：繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对较少。十二、目的基因的检测检测对象染色体DNA上是否导入目的基因目的基因是否转录出mRNA目的基因是否翻译出蛋白质技术DNA分子杂交分子杂交抗原-抗体杂

7、交十三、DNA探针：利用放射性同位素等方法标记的，含有目的基因特异性片段的单链DNA分子。十四、个体水平的鉴定：观察受体生物是否表现出目的基因所控制的性状；基因工程的生物产品与天然产品的功能活性比较。十五、启动子：一段具有特殊结构的DNA片段，位于基因的首段，它是RNA聚合酶识别和结合的部位。十六、终止子：位于基因的尾端，也一段具有特殊结构的DNA片段，是转录种植的信号。十七、农杆菌转化法、显微注射法、钙离子处理法的步骤：略。十八、DNA分子杂交、分子杂交、抗原-抗体杂交的过程：略。十九、鸟枪法、反转录法的步骤：略。