蜘蛛丝基因MaSp1在转基因家蚕中的表达分析（英文）.pdf

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1、安徽农业大学学报，2013，40(2)：169—174JournalofAnhuiAgriculturalUniversity网络出版时间：2013-3．717：53：26[URL]http：／／www．cnki．net／kcms／detail／34．1162．S．20130307．1753．035．btml蜘蛛丝基因MaSpl在转基因家蚕中的表达分析韩冷，张磊1,2中垣雅雄(1．信州大学纤维学部应用生物系，上田386-8567；2．安徽省农业科学院蚕桑研究所，合肥230061)摘要：利用反向PCR、定量PCR以及免疫共沉淀等方法分析研究转

2、基因家蚕的丝素蛋白及基因的结构和性质。结果表明：(1)在DNA水平上，MaSpl基因整合进了家蚕的基因组，插入位点位于scafold868；(2)在RNA水平上，MaSp的表达并不干扰其他3个基因(Fib．tt,Fib．LandP25)的表达水平，并且外源基因MaSp的表达水平略高于Fib-H；(3)在蛋白质水平上，MaSpl蛋白的丰度大约占丝素总蛋白的2％，而且通过自身的LBS区段和轻链蛋白(Fib．L)形成分子间二硫键，从而融入蚕丝蛋白复合体。关键词：转基因家蚕；蜘蛛牵引丝；蛋白质．蛋白质相互作用中图分类号：S881．26文献标识码：A

3、文章编号：1672—352X(2013)02—0169-06ExpressionanalysisofspiderdraglinesilkgeneMaSp1inthetransgenicsilkwormHANLeng，ZHANGLei，NAKAGAKIMasao(1-DivisionofAppliedBiology,FacultyofTextileScienceandTechnology,ShinshuUniversity,Ueda386-8567，Japan；2．SericulturalResearchInstitute，AnhuiAcad

4、emyofAgriculturalSciences，Hefei230061)Abstract：T0studythebiologicalpropertiesandstructureoffibroingenesandproteinsfromtransgenicsilkworms。the~ansgenicsilkwormswereanalyzedwithinversePCR，real-timePCRandco—IPmethods．There—sultsshowedthefollowing：(1)AttheDNAlevel，MaSpl(majora

5、mpullatespidroin1)wasintegratedintotheB．morichromosomeatscafold868；(2)AttheRNA1evel，thetranscriptionofMaSpldidnotafectthetranscriptionof只6—Fib-LorP25，andthetranscription1evelofMaSplwashigherthanthatof厅6—(3)Attheproteinlevel，MaSpl，theforeignsilkprotein，hadlowabundanceamongt

6、hetotalsilkfibroinproteins(approximate2％)．Additionally,ithadaprotein．proteininteractionwithFib—LthroughitsLBSrL—chain·bindingsite)regionthroughintermoleculardisulfidebonds．Keywords：~ansgenicsilkworm；spiderdraglinesilk；protein—proteininteractionnibalistictZkTherefore．itisdi

7、fculttoobtainlarge1Intr0ductiOnamountsoffibrousspidersilk．Instead，researchersSpiderdraglinesilkisafibrousproteinwithahavecreatedbiomimeticsilksthroughtransgenicuniquecombinationoftensilestrengthandelasticity．Ittechnologiesusingpartial-lengthsilkeDNAsequenceismorethantwicea

8、stoughasanypreviouslyde-overexpressioninmanydiferenttypesoforganismssuchasEscherichiacob[