血管紧张素Ⅱ对人单核细胞源树突状细胞免疫功能的影响.pdf

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1、中国病理生理杂志ChineseJournalofPathophysiology2014，30(4)：681-685·681·[文章编号]1000·4718(2014)04—0681-05血管紧张素Ⅱ对人单核细胞源树突状细胞免疫功能的影响木黄东，陆浩，姚康，孙爱军，邹云增，葛均波(复旦大学附属中山医院心内科，上海市心血管病研究所，上海200032)[摘要】目的：探讨血管紧张素II(AngII)对人单核细胞源树突状细胞(DCs)免疫成熟进程及摄取氧化低密度脂蛋白(Ox．LDL)功能的影响。方法：采用密度梯度离心结合免疫磁珠法分离人外周血CD14单核细胞，经含100峭／L重组人粒细胞一巨噬细胞集落刺

2、激因子(rhGM-CSF)和50L重组人IL-4(rhlL-4)的RPMI-1640培养液培养，诱导分化为未成熟DCs。经不同浓度的AngII干预24h，另用10I~mol／L血管紧张素II受体1拮抗剂洛沙坦预处理后再加入AngII干预，采用流式细胞术检测细胞免疫表型(CD83和HLA—DR)，酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测细胞培养上清液中细胞因子(IL-l2和IFN·_y)的浓度；通过加入10ms／L的荧光DiI标记的Ox-LDL，用流式细胞仪检测DiI．Ox．LDL的摄取分数；采用real-timePCR法检测清道夫受体A(SRA)、CD36和凝集素样氧化低密度脂蛋白受体1(LOX．

3、1)mRNA的表达。结果：(1)AngII干预可上调DCs表面成熟标志物CD83和HLA-DR的表达，且分泌细胞因子IL．12和IFN-水平升高，10~moVL洛沙坦预处理可明显抑制AngII诱导的DCs成熟。(2)AngII干预可促进DCs对DiI-Ox—LDL的摄取，洛沙坦预处理可部分抑制DCs对DiI-Ox-LDL的摄取。(3)AngII干预可上调LOX．1mRNA的表达，但对SR-A和CD36的表达无明显影响，洛沙坦预处理可明显抑制LOX·lmRNA的表达，但SR．A和CD36的表达无明显变化。结论：AngII可促进DCs的免疫成熟，并且可能通过上调LOX一1的表达，促进DCs对Ox．

4、LDL的摄取，这可能是AngII促动脉粥样硬化的新机制。[关键词]树突状细胞；氧化低密度脂蛋白；血管紧张素II；洛沙坦；凝集素样氧化低密度脂蛋白受体1[中图分类号]R363[文献标志码]Adoi：10．3969／j．issn．1000-4718．2014．04．019Innnunematurationofhumanmonocyte．deriveddendriticcellsinducedbyangiotensinIIHUANGDong，LUHao，YAOKang，SUNAi-jun，ZOUYun—zeng，GEJun—bo(DepartmentofCardiology，ShanghaiInst

5、ituteofCardiovascularDiseases，ZhongshanHospital，FudanUniversity，Shang-hai200032，China．E-mail：ge．junbo2@嚣一hospita1．sh．cn)[ABSTRACT]AIM：ToinvestigatetheeffectsofangiotensinII(AngII)ontheimmunematurationandtheoxi-dizedlow-densitylipoprotein(Ox—LDL)-uptakingcapacityofhumanmonocyte-deriveddendriticcells(

6、DCs)．METH-ODS：Humanperipheralbloodmononuclearcellswereisolatedbydensitygradientcentrifugation，andthemonocyteswerepurifiedbypositiveselectionwithanti·CD14magneticbeads．AfterculturedwithrhGM—CSF(100g／L)andrhlL-4(50g／L)for5d，themonocytesdiferentiatedintoimmatureDCs．Onthe6thdayoftheculture，theceilsweret

7、reatedwithvariousconcentrationlevelsofAngIIorpretreatedwithlosartan．Theimmun0phenotypicexpressionofHLA—DRandCD83wasanalyzedbyflowcytometry．ThesecretionlevelsofIL一12andIFN-_yintheculturesupernatantswer