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时间:2020-06-06
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1、酶法制备葡萄糖酸钙月饼小分队:白朋纲杨梦雪姜昌熊张雪冰钙是体内含量最大的无机物,为维持人体神经,肌肉,骨骼系统,细胞膜和毛细血管通透性正常功能所必需。葡萄糖酸钙在中国和许多国家的药典里都有收藏,是一种我们比较熟悉的的药物,葡萄糖酸钙常常被用来做补钙剂。它有利于人体骨质的形成,对青少年骨骼发育有促进作用,同时由于它是一种抗过敏溶解度高,生理活性大的钙营养药,可以治疗生理性缺钙症和血钙引起的手足抽搐、痉挛等症,以及治疗软骨、佝偻等缺钙症。发酵法:营养盐和黑霉菌种子营养液,进行发酵。发酵液加石灰乳中和,过滤,滤
2、液减压浓缩,结晶得到粗品,经精制得到葡萄糖酸钙。(生产成本较高,纯化工艺较复杂)试验原理(1)α-淀粉酶(EC3.2.1.1)又称液化型淀粉酶,它作用于淀粉时,随机的从淀粉分子内部切开α-1,4糖苷键,使淀粉水解成糊精和一些还原糖。(2)糖化酶(EC3.2.1.3)又称葡萄糖淀粉酶,它作用于淀粉时,从淀粉分子的非还原端开始逐个地水解α-1,4糖苷键,生成葡萄糖和一些低聚糖,且糖化酶还有一定的水解α-1,6糖苷键和α-1,3糖苷键的能力(C6H10O5)n+nH2OnC6H10O6α-淀粉酶糖化酶试验原理(
3、3)葡萄糖氧化酶(EC1.1.3.4)是一种糖蛋白,它能够特异性的氧化β-D-葡萄糖生成中间产物D-葡萄糖酸-δ-内酯和过氧化氢,并发生非酶促反应水解为葡糖酸。(4)过氧化氢酶(EC1.1.1.1.6)它以过氧化氢作为专一的底物,催化过氧化氢分解为水和氧气保护酶受到过氧化氢的毒害。4C6H12O6+3O2+2H2O4C6H12O7+2H2O2葡萄糖氧化酶2C6H12O7+CaCO3Ca(C6H11O7)2+CO2+H2O2H2O22H2O+O2过氧化氢酶实验器材500ML烧杯,PH试纸,玻璃棒,水浴锅,电
4、炉,石棉网,温度计,滤纸,漏斗,电子天平,量筒等常用试验用器材试验试剂淀粉,a-淀粉酶,糖化酶,葡萄糖氧化酶,过氧化氢酶,NaOHNa2CO3,CaCO3,CaCl2,碘液,活性炭等等操作步骤一,葡萄糖标准曲线配置5个梯度浓度的葡萄糖标准溶液各取1mL分装于五支试管中设置一个空白组分别加入2mLDNS试剂沸水浴中2min后取出加蒸馏水至15mL测定吸光值,获得标准曲线操作步骤45g淀粉+150ml水搅拌Na2CO3调节pH=6--6.4加入a-淀粉酶,72℃加热搅拌15min再加热至90℃30min淀粉糊
5、化加热到沸腾10min,酶失活二,液化冷却至55-60℃加入糖化酶调节ph=4.5于60-65℃恒温水浴糖化3-4h加入活性炭,在80℃搅拌30min抽滤,得到透明糖液测量葡萄糖含量三,糖化操作步骤四,双酶氧化葡萄糖+CaCO3(过量)加过氧化氢酶和葡萄糖氧化酶35℃搅拌反应,通过pH判断反应进行的程度反应结束,加活性炭脱色获得葡萄糖酸钙溶液操作步骤试验结果吸光值1.4142.6822.8912.9583.01浓度(%)0.51357样品的吸光值为1.636,通过表中的数据整合出的标准曲线得出葡萄糖的浓度
6、为0.58%试验过程及其产物照片谢谢!
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