分子生物学实验技术课模拟试卷.doc

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1、分子生物学实验技术课模拟试卷姓名：学号： 得分:考试誓言在此，我以诚实和名誉保证：我独立完成该试卷，未与他人讨论或告知他人答案。签名：（签字后得分才有效）题目-分值1-102-103-104-105-256-107-158-10合计得分1、你想采用PCR技术扩增pEGFP-N1中绿荧光蛋白（GFP）的序列，通过基因A中的BamH1位点将GFP序列插入基因A的编码序列中，并保证全长融合蛋白的表达。请根据下列信息设计用于扩增GFP的引物。A．B．A基因的部分序列如下：…..GCCAGTGGGATCCTGATTGCC…..AlaSer

2、GlyIluArgIluAlaGGATCC为BamH1位点2、你在做一个DNA连接反应。经酶切回收的质粒载体大小为5055bp、1:50稀释后测OD260＝0.2；插入DNA片段大小为675bp、1:40稀释后测OD260＝0.1。请按载体DNA与插入DNA片段克分子数比为1:3和载体DNA总量约0.15x10-12mole计算，完成下列工作表（每个核苷酸残基的平均分子量以330计）：10xBufferVectorDNAInsertDNAH2OT4ligaseTotalVolume2mlmlmlml1ml20ml3、下图是一个质

3、粒图谱，标明其主要构件和作用。并根据构建特征，指出该载体的类型和功能特征。提示：pIRES-EGFPcontainstheinternalribosomeentrysite(IRES)oftheencephalomyocarditisvirus(ECMV)betweentheMCSandtheEGFP(enhancedgreenfluorescentprotein)codingregion.Thispermitsboththegeneofinterest(clonedintotheMCS)andtheEGFPgenetobetr

4、anslatedfromasinglebicistronicmRNA.4、你从大鼠脑组织中克隆了一个新基因，并已知是一种膜蛋白，根据cDNA序列得知氨基酸残基为882个，同时你已制备了特异性单克隆抗体。下图分别是针对原核细胞表达产物、真核细胞表达产物和大鼠组织样本的免疫印迹结果：1、原核细胞表达产物2、原核细胞对照3、真核细胞表达产物4、真核细胞对照5、大鼠脑皮层组织6、大鼠心脏组织请解释结果，并设计实验来验证你的判断。4、SARS病毒全基因组测序和相关蛋白的鉴定已完成。你想利用pETBlue-2载体表达SARS棘蛋白（surf

5、acespikeglycoprotein）作进一步研究。你已有SARS病毒RNA、原核表达载体pETBlue-2、其他相关试剂和实验设备；并知道以下相关信息如下：①SARS棘蛋白的编码序列（下列为SARS基因组部分序列，棘蛋白序列从21492到25259bp）：21421gtaggcttatcattagagaaaacaacagagttgtggtttcaagtgatattcttgttaaca21481actaaacgaacatgtttattttcttattatttcttactctcactagtggtagtgaccttg21541a

6、ccggtgcaccacttttgatgatgttcaagctcctaattacactcaacatacttcatcta21601tgaggggggtttactatcctgatgaaatttttagatcagacactctttatttaactcagg21661atttatttcttccattttattctaatgttacagggtttcatactattaatcatacgtttg21721gcaaccctgtcataccttttaaggatggtatttattttgctgccacagagaaatcaaatg21781ttgtccgt

7、ggttgggtttttggttctaccatgaacaacaagtcacagtcggtgattatta21841ttaacaattctactaatgttgttatacgagcatgtaactttgaattgtgtgacaaccctt21901tctttgctgtttctaaacccatgggtacacagacacatactatgatattcgataatgcat21961ttaattgcactttcgagtacatatctgatgccttttcgcttgatgtttcagaaaagtcag22021gtaattttaaacact

8、tacgagagtttgtgtttaaaaataaagatgggtttctctatgttt22081ataagggctatcaacctatagatgtagttcgtgatctaccttctggttttaacactttga22141aacctatttttaagtt