硼酸亲和整体柱的制备及其在液相色谱中的应用.pdf

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1、第37卷第1期南京工业大学学报(自然科学版)Vol-37No．12015年1月JOURNALOFNANJINGTECHUNIVERSITY(NaturalScienceEdition)Jan．2015doi：10．3969／j．issn．1671—7627．2015．01．005硼酸亲和整体柱的制备及其在液相色谱中的应用卢圣国，段许佳，罗芳，黄和，韩毓旺(1．南京工业大学生物与制药工程学院，江苏南京210009；2．南京工业大学理学院，江苏南京210009)摘要：选用4一乙烯基苯硼酸(VPBA)为亲和单体、乙二醇／二甘醇为致孔剂，在常规液相色谱柱内，通过乙二醇二甲基丙烯

2、酸酯(EDMA)交联作用原位聚合，制备了一种硼酸整体柱。通过优化VPBA与EDMA的质量比优化整体柱性能，并用扫描电子显微镜(SEM)及N：吸附法(BET)测定其结构及孔径分布。结果表明：聚(VPBA—CO—EDMA)整体柱对辣根过氧化物酶(糖蛋白)的动态吸附量为2．338mg／g，大于牛血清白蛋白(非糖蛋白)的吸附量0．025mg／g。在高效液相色谱(HPLC)分离中，该柱可快速分离含顺式羟基的化合物，进一步应用于对人全血试样的糖化血红蛋白分离，表现了优良的分离性能，且准确度与酶法测试结果相近，相对标准偏差(RSD)=2．6％。关键词：4一乙烯基苯硼酸；乙二醇二甲基丙

3、烯酸酯；糖化血红蛋白；原位；高效液相色谱中图分类号：0657．7文章编号：1671-7627(2015)01-0027—05PreparationofboronateafinitymonolithiccolumnanditsapplicationinliquidchromatographyLUShengguo，DUANXujia，LUOFang，HUANGHe，HANYuwang(1．CollegeofBiotechnologyandPharmaceuticalEngineering，NanjingTechUniversity，Nanjing210009，China；2

4、．CollegeofScience，NanjingTechUniversity，Nanjing210009，China)Abstract：Poly(vinylbenzeneb0ronieacid-CO—ethylenedimethacrylate)monolithiccolumnwaspreparedby”in—situ”processwithviny1benzeneb0r0nicacid(VPBA)asfunctionalmonomer，diethyleneglycol／ethyleneglycolasporogenandethylenedimethacrylate(

5、EDMA)ascrosslinker．DifferentratiosofVPBAtoEDMAwereusedforoptimizingthepropertiesofmonolithiccolumn．Themorphologyandporesizedistributionofthemonolithweredeterminedbyscanningelectronmicroscope(SEM)andN2adsorption．Resultsshowedthatthedynamicadsorptioncapacityofhorseradishperoxidase(HRP)was2

6、．338mg／g，higherthanthatobtainedf0rbovineseYumalbumin(BSA)，itwas0．025mg／g．Theboronateaffinitymonolithiccolumnexhibitedspecificcaptureforc／s—diol—containingcompounds．Inaddition，itcouldbeappliedtopurificationofglycosylatedhemoglobininthebloodinhighperformanceliquidchromatography(HPLC)，thusi

7、thadgoodaccuracyasenzymicmethodandtherelativestandarddeviation(RSD)ofrepeatabilitywas2．6％．Keywords：vinylbenzeneboronicacid(VPBA)；ethylenedimethacrylate(EDMA)；glycosylatedhemoglobin；insitu；highperformanceliquidchromatography(HPLC)收稿日期：2013—1卜07作者简介：卢圣国(1985一)，男，浙江温州人，博士生，主