消毒及灭菌方法.doc

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1、消毒及灭菌的方法消毒及灭菌的定义:1.消毒定义:利用化学或物理方法,杀死大部份致病微生物的过程。区分为高程度消毒(High-levelDisinfection)、中程度消毒(Intermediate-levelDisinfection)、低程度消毒(Low-levelDisinfection)三种方式。2.灭菌的定义:以化学剂或物理方法消灭所有微生物,包括所有细菌的繁殖体、芽孢、霉菌及病毒,而达到完全无菌之过程。灭菌消毒技术是微生物有关工作中最普通也是最重要的技术。几种非热灭菌技术:1.冷冻真空干燥(vacuo-lyophilization)灭菌冷冻:-2

2、0℃以下,细胞原生质内水分结冰,破坏其胶体状态并机械挤压,刺伤菌体而死亡。真空:抽去空气呈低氧或绝氧状态,抑制正常呼吸干燥:导致菌体脱水和盐类浓度增高,抑制代谢活动正常进行2.微波(microwave)灭菌微波:是频率范围为300~300000MHz的无线电波,与其他波段的无线电波相比,其具有波长短,振荡周期短,似光波性和频率很高等特点。微波灭菌机理:微波的热效率高;介质分子振荡旋转速度快;菌体脱水,蛋白质凝固;染色体、细胞膜、酶系统发生变性。3.γ射线(γ-rayradiation)灭菌γ射线:是一种波长非常短能量非常大,有强烈穿透力使物质产生电离作用的

3、电磁波。γ射线灭菌机理:低剂量的γ射线诱发生物变异。高剂量γ射线使水分子电离,生成具有强氧化性的H+和强还原性的OH-,直接作用菌体细胞本身;电离产生的电子和环境的分子氧结合,氧化菌体内酶的化学基团使酶失活;辐射能导致DNA降解或其他物质分解,造成死亡。4.化学熏蒸(fumigating)灭菌法化学熏蒸的概念:在一定温度和压力的密闭条件下,化学毒剂由固态或液态迅速转成气态渗透到生物体内,使生物致死。常用熏蒸灭菌剂(1)甲醛(HCHO)R—NH2+HCHOR—NH2•CH2O甲醛的灭菌机理在于它的还原作用与蛋白质的氨基结合使其变性,从而破坏了酶系统和细胞膜、

4、细胞壁的结构(2)环氧乙烷(CH2OCH2)R—SH+CH2OCH2R—S—CH2CH2OH环氧乙烷的灭菌机理在于它与蛋白质的氨基、羟基、酚基和巯基结合使其变性,抑制氧化酶和脱氢酶的活性,破坏菌体正常代谢熏蒸设备:简易消毒箱、真空熏蒸机、熏蒸消毒室高压杀菌技术所谓高压杀菌是指将食品放人液体介质中,加100MPa-1000MPa的压力作用一段时间后,如同加热一样,杀灭食品中的微生物的过程。高压灭菌通常认为蛋白质在高压下立体结构(四级结构)崩溃而发生变性而使细菌失活,但也有人认为凡是以较弱的结合构成的生物体高分子物质如核酸、多糖类、脂肪等物质或细胞膜都会受到超

5、高压的影响,尤其通过剪切力而使生物体膜破裂,从而使生物体的生命活动受到影响甚至停止,这就可以达到灭菌、杀虫和效高压脉冲电场杀菌技术高压脉冲技术用于食品灭酶灭菌,主要原理是基于细胞结构和液态食品体系间的电学特性差异。当把液态食品作为电介质置于电场中时,食品中微生物的细胞膜在强电场作用下被电击穿,产生不可修复的穿孔或破裂,使细胞组织受损,导致微生物失活。证实在脉冲电场强度为12-40Kv/cm,脉冲时间为20μs-18μs的条件下,可有效地对食品进行灭菌,且以双矩形波最为有效。脉冲强光杀菌技术脉冲强光杀菌是利用强烈白光闪照的杀菌技术,其系统主要包括动力单元和灯

6、单元,动力单元为惰性气体灯提供能量,灯便放出只持续数百微秒,其波长由紫外光区域至近红外光区域的强光脉冲,其光谱阳光相似,但比阳光强几千倍至数万倍。由于只处理食品表面,从而对食品营养成分影响很小,JosephDunn等人研究表明,脉冲强光对多数微生物有致死作用。物理方法1、温度  利用温度进行灭菌、消毒或防腐,是最常用而又方便有效的方法。高温可使微生物细胞内的蛋白质和酶类发生变性而失活,从而起灭菌作用,低温通常起抑菌作用。1)干热灭菌法:  a.灼烧灭菌法:利用火焰直接把微生物烧死。此法彻底可靠,灭菌迅速,但易焚毁物品,所以使用范围有限,只适合于接种针、环、

7、试管口及不能用的污染物品或实验动物的尸体等的灭菌。  b.干热空气灭菌法:这是实验室中常用的一种方法,即把待灭菌的物品均匀地放入烘箱中,升温至160°C,恒温1小时即可。此法适用于玻璃皿、金属用具等的灭菌。2)湿热灭菌法:  在同样的温度下,湿热灭菌的效果比干热灭菌好,这是因为一方面细胞内蛋白质含水量高,容易变性。另一方面高温水蒸汽对蛋白质有高度的穿透力,从而加速蛋白质变性而迅速死亡。  a.巴氏消毒法:有些食物会因高温破坏营养成分或影响质量,如牛奶、酱油、啤酒等,所以只能用较低的温度来杀死其中的病原微生物,这样既保持食物的营养和风味,又进行了消毒,保证了

8、食品卫生。该法一般在62°C,30分钟既可达到消毒目的。此法为法国

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