缺血缺氧中心区星形胶质细胞死亡方式与钠钾ATP酶活性及NKCC1表达的关系.pdf

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1、第44卷第3期第268页华中科技大学学报(医学版)V01.44No.3P.2682O15年6月ActaMedUnivSciTechnolHuazhongJun.2015缺血缺氧中心区星形胶质细胞死亡方式与钠钾ATP酶活性及NKCC1表达的关系*卢艺,褚晓凡,黄巧英,曹旭,邹良玉,张莹深圳市人民医院神经内科,深圳518000摘要:目的通过改良的糖氧剥夺(oxygenglucosedeprivation,OGD)模型,探讨缺血缺氧中心区星形胶质细胞损伤后的细胞死亡途径与细胞膜损伤中钠钾ATP酶(NaKATPase)活性及钠一钾一氯共转运体1(NaK2C1

2、一cotrans—porter1,NKCC1)表达的关系。方法取出生24h内的SD大鼠海马星形胶质细胞进行体外培养,鉴定其纯度,应用改良的OGD模型,将星形胶质细胞进行OGD(0、1、2、3、4、6h)处理后检测不同时间点细胞的胀亡率、凋亡率、ATP含量、钠钾ATP酶的活性及NKCC1的表达水平。结果星形胶质细胞存活率随OGD时间的延长而降低,0GD3h后胀亡细胞率超过凋亡细胞率。ATP含量和钠钾ATP酶活性随0GD时间的延长而下降,NKcc1的表达随着()GD时间的延长先增加后减少,在0GD3h后明显减少。结论缺血缺氧中心区星形胶质细胞死亡在OGD

3、3h内以凋亡为主,0GD3h后胀亡是细胞死亡的主要方式,这种转化或许与Na,K__ATPase活性及NKCC1表达的激活有关。关键词:星形胶质细胞;糖氧剥夺模型;胀亡;钠钾ATP酶;钠一钾一氯共转运体1中图分类号:R364.4DO1:10.3870/j.issn.1672—0741.2015.03.005RelationshipbetweentheAstrocyteDeathPathwayintheIschemicCoreandtheActivityofNa+,K+-ATPaseortheExpressionofNKCC1LuYi,ChuXiaofa

4、n,HuangQiaoyingetalDepartmentofNeurology,ShenzhenPeople’sHospital,Shenzhen518000,ChinaAbstractObjectiveTostudytherelationshipbetweentheastrocytedeathpathwayintheischemiccoreandtheactivityofNa+,K+一ATPaseortheexpressionofNa+一K+一2C1一cotransporter1(NKCC1)byusingmodifiedoxygenandglu

5、cosedepriva—tion(OGD)mode1.MethodsAstrocytesofthenewbornSDrats(within24h)wereculturedinvitroandthecel1purityidenti—fled.Theoncosisrateandapoptosisrateofastrocytes,thecontentofATP,theactivityofNa一KATPaseandtheexpressionofNKCC1weredetectedbyuseofthemodifiedOGDmodelafterOGDfor0,1,

6、2,3,4or6h.ResultsTheviabilityofastro—cyteswasdecreasedwiththeextensionofOGD.Theoncosisratewasgreaterthantheapoptosisrateafter3hOGD.ThecontentofATPandtheactivityofNa一K一ATPaseweredecreasedwiththeextensionof0GD.TheexpressionofNKCC1wasfirstin—creasedandthendecreasedwiththeextension

7、of0GD,anditwassignificantlyreducedafterOGDfor3h.ConclusionThemaindeathpathwayofastrocytesintheischemiccoreisapoptosiswithin3hofOGDandbecomesoncosisafter3一hOGD.whichmayberelatedtotheNa一KATPaseactivityandtheNKCC1expression.Keywordsastrocytes;oxygen-glucosedeprivationmodel;oncosis

8、;Na一K。。一ATPase;Na一K一2C1一cotransporterl星形胶质细胞是中枢神经系统中数量

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