去甲斑蝥素对白血病细胞系K562的增殖、凋亡、细胞周期及NF-κB活性的影响.pdf

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1、·406·临床肿瘤学杂志2015年5月第20卷第5期ChineseClinicalOncology，May2015，Vo1．20，No．5去甲斑蝥素对白血病细胞系K562的增殖、凋亡、细胞周期及NF—KB活性的影响515041广东汕头汕头大学医学院第二附属医院血液肿瘤科{I9铠涛，陈江声，陈春莉【摘要】目的探讨去甲斑蝥素(NCTD)对白血病细胞系K562的增殖、凋亡、细胞周期及核因子(NF)．KB活性的影响。方法采用CCK-8试剂盒检测不同浓度NCTD(0、10、25、50、100~mol／L)处理K562细

2、胞24、48、72、96h后的增殖抑制率，采用流式细胞术检测不同浓度NCTD处理24、48h后的细胞凋亡率和处理48h后的细胞周期，采用原位细胞凋亡检测试剂盒(Tunne1)检测不同浓度NCTD处理24、48h后的细胞凋亡指数，采用Westernblotting检测不同浓度NCTD处理48h后的NF-KBp65及IKB一0【水平以评价NF—KB活性的变化。结果在10~100}Lmol／L范围内，NCTD可呈时间和浓度依赖的方式升高K562细胞的增殖抑制率，各浓度间的差异有统计学意义(P

3、ol／L相比，其余各浓度处理24、48h后的凋亡率和凋亡指数均升高，处理48h后的G0／G期细胞比例升高，s、G／M期细胞比例均降低，NF．KBp65水平降低，IKB．o／．水平升高，以上差异均有统计学意义(P

4、norcantharidinontheproliferation，apoptosis，cellcycleandactivityofNF—KBonhumanleuke-miacelllineK562YAOKaitao，CHENfiangsheng，CHENChunli．DepartmentofHematologyandOncology，theSecondAfiliatedHospitalofShantouUniversityMedicafCollege，Shantou515041，China【Abstract】

5、ObjectiveToinvestigatetheeffectofnorcantharidin(NCTD)onproliferation，apoptosis，cellcycleandtheac—tivityofnuclearfactor(NF)一KBonhumanleukemiacelllineK562．MethodsTheK562cellwastreatedwithdifferentconcentrationsofNCTD(0，10，25，50，100I~moVL)andtheproliferationin

6、hibitionratesweremeasuredbyCCK一8kitat24，48，72，96hpost—treatment．Theapoptoticratesat24and48htogetherwithcellcycleat48hafterNCTDtreatmentswereevaluatedviaflowcytometry．Theinsitucelldeathdetectionkit(Tunne1)wasappliedtomeasurethelevelsofapoptosisat24and48hpost

7、—treatment．AsfortheactivityofNF-KB．1evelsofp65subunitofNF—KBandIKB一仅weredetectedbyWesternblottingat48hpost—treatment．ResultsNCTDintherange10to100pumol／LcouldincreasetheproliferationinhibitionratesonK562cellsinadose-andtime·-dependentman-ner(P<0．05)．Incompar

8、isonwith0txmol／LNCTD，therewereelevatedapoptoticratesandindicesat24and48hpost—treatment(P<0．05)．ThetreatmentwithNCTD(10—100pumol／L)resultedinahigherproportionofcellswithinG0／G1phasebutalowerproportionof