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《蒺藜总皂苷对大鼠肺缺血再灌注损伤后细胞凋亡的影响.pdf》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、66O陕西医学杂志2015年6月第44卷第6期蒺藜总皂苷对大鼠肺缺血再灌注损伤后细胞凋亡的影响西安市中心医院(西安710003)杜旭升黄妙毅刘志燕李建英摘要目的:探讨蒺藜总皂苷(GSTT)对大鼠肺缺血再灌注损伤后细胞凋亡的影响。方法:建立在体肺缺血再灌注模型。将3O只大鼠随机分为正常对照组(C组),缺血再灌注组(IR组),蒺藜总皂苷组(G组)。每组分别在再灌120min时处死10只大鼠,留取右肺组织,原位细胞凋亡检测(TUNEL)法检测肺组织中细胞凋亡指数(AI)及免疫组化法检测肺组织Bcl一2、Bax蛋白的表达。结果:
2、IR组肺组织AI、Bax/Bcl一2的表达均明显升高,而预先给予GSTT干预后,G组均可以减弱缺血再灌注诱导上述指标的变化。结论:GSTT可通过下调Bax/Bcl一2蛋白表达,从而抑制细胞凋亡,对肺缺血再灌注损伤起到保护作用。主题词肺再灌注损伤细胞凋亡基因,bcl一2@蒺藜总皂苷【中图分类号】R563.9【文献标识码】Adoi:10.3969/j.issn.1000—7377.2015.06.007Theeffectsofgrosssaponinfromtribulusterrestrisonapoptosisinlun
3、gischemia—reperfusioninjuryXi’anCentralHospital(Xian710003)DuXushengHuangMiaoyiLiuZhiyanetalABSTRACTObjective:Toinvestigatetheeffectsofgrosssaponinfromtribulusterrestris(GSTT)onpneumoeyteapoptosisinlungisehemia—reperfusioninjury.Methods:Thirtyhealthyratswererando
4、mlydividedintothreegroups:Cgroup,IRgroup,Ggroup.After120minreperfusion,TUNELassaywasappliedtodetectlungapop—toticindex(AI)andimmunohistoehemicalSPtechniquewasusedtodetecttheexpressionsofBcl一2andBaxprotein.Results:GSTTcoulddecreaseAI(P~O.05),andlowerBaxproteinexpr
5、ession(P<0.05).Conclusion:GSTTcanre—ducelungapoptosisthroughregulatingproteinexpressionsofBcl2andBax,SOthatitprovidessignificantprotectiveeffectsonlungischemia—reperfusioninjury.KEYWoRDSLungReperfusioninjuryApoptosisGenes,bcl2@Tribulusterrestris现已证实,细胞凋亡在肺缺血再灌注损伤
6、(LIR1)d,连续10d,第1O次灌胃后1h行手术,其余操作同中起着重要作用,过度凋亡可引起肺组织损伤,蒺藜总IR组。C组和IR组采用与G组相同时点与方法灌人皂苷(GSTT)可通过抑制细胞凋亡而对心肌及缺血再等量生理盐水。②模型的建立:采取既往研究的建模灌注后脑组织起到保护作用n]。本研究拟通过观察方法lL2],制成在体肺缺血再灌注模型,各组分别于再灌GSTT对LIRI时细胞凋亡及其相关蛋白Bax/Bcl一2120min后处死大鼠,留取右肺中叶作为标本。③肺组的影响,并探讨其可能机制。织细胞凋亡指数(AI)检测:采用原
7、位缺口末端标记法材料与方法(TUNEL),按照试剂盒说明书对右肺中叶凋亡细胞进1材料心脑舒通胶囊(蒺藜总皂苷粉,吉林行定量检测,细胞核呈棕黄色为阳性细胞,高倍镜下敖东洮南药业公司),凋亡检测试剂(POD,北京中山生(×400)随机选择10个视野观察阳性细胞,AI即为阳物技术有限公司),Bcl一2、Bax抗体(美国Santacruz公性细胞所占百分数。④免疫组化sABC法检测肺组织司),SABC过氧化物酶试剂盒购自武汉博士德公司,Bcl一2、Bax蛋白:肺组织切片常规脱蜡,3HO阻断PBS缓冲液:自行配制,每升中含8gNa
8、C1,0.2gKC1,内源性过氧化物酶,复合消化液暴露抗原,封闭非特异1.44gNa2HPO,0.24gKH2PO,pH调至7.4,余为性抗原后滴加1:100稀释的i抗,37℃1h,阴性对照市售纯试剂,3O只雄性Wistar大鼠,体重220~240g为PBS替代1抗;滴加山羊抗兔II抗IgG,37℃(山西医科大学动物
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