鸡传染性法氏囊病毒在DF-1细胞系上繁殖特性研究.pdf

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1、第45卷第6期河南农业大学学报Vo1．45No．62011拄12月JournalofHenanAgriculturalUniversityDec．2O11文章编号：1000—2340(2011)06—0662～06鸡传染性法氏囊病毒在DF一1细胞系上繁殖特性研究王永生，周欣，杨霞，陈陆，王川庆，王泽霖(河南农业大学牧医工程学院，河南郑州450002)摘要：对鸡传染性法氏囊病毒(IBDV)HQ株在DF一1细胞上的适应及增殖条件进行了研究，结果表明，HQ株不适应在Vero细胞上生长．而在DF．1细胞上能够很好的适应．经培养条件优化，最终选用pH值为

2、7．0，血清含量体积分数为2％的DMEM／F12培养基做维持液，在细胞传代后第2天接种IBDVHQ株，接毒量为l％(约0．7MOI)后36h收毒，毒价可达8．5mL以上，是在CEF细胞上培养时毒价的lO倍．HQ株在DF-l细胞上培养24～36h上清液与全悬液毒价基本相同，维持在同一高峰．糖耗的高峰要先于病毒毒价高峰的出现，糖耗在高峰之后快速下降，当降低到接近O时病毒的毒价最高．关键词：传染性法氏囊病毒；DF一1细胞；病毒感染复数；糖耗；毒价中图分类号：$855．3文献标志码：AResearchonthebreedingcharactersofI

3、BDVonDF-lcelllineWANGYong-sheng，ZHOUXin，YANGXia，CHENLu，WANGChuan-qing，WANGZe-lin(CollegeofAnimalHusbandryandVeterinaryScience，HenanAgriculturalUniversity，Zhengzhou450002，China)Abstract：StudyonadaptionandpropagationconditionsofIBDVHQstrainpropagatedinDF一1cellssuggeststhatvero

4、cellsarenotsuitableforIBDVHQstraintopropagatebutDF-1cellsare．Inflaskop-timizationtestprovedthatDMEM／F12containing2％serum，pH7．0，1：100inoculationconcentrationofIBDVand36hcuhivationforIBDVharvestingafteritsinoculationweretheoptimalconditionswhenIBDVwaspropagatedonDF一1，thetiters

5、aremorethan8．5mLand10timesashighasthosepropa-gatedinverocells．ThetitersofcellsuspensionandsupernatantonDF-1cellarebasicallythesameafterinoculationfor24～36h．Thepeakconsumptionofsugarcamebeforethatoftitersanddecreasedabruptlyafterthetop．ThetitersofIBDVwerethehighestwhenthecons

6、umptionofsugarwasnearze—ro．Keywords：infectiousbursaldiseasevirus(IBDV)；DF-1cell；multiplicityofinfection(MOI)；sugarconsumption；virustiter鸡传染性法氏囊病是由鸡传染性法氏囊病毒苗通常采用鸡胚成纤维细胞(CEF)培养病毒液来(Infectiousbursaldiseasevirus，IBDV)引起的雏鸡制备，因IBDV在CEF细胞上增殖滴度不高，所以的一种急性传染病．目前，该病主要通过疫苗接种免疫效果欠佳．DF．1

7、细胞是CEF的传代细胞系，具来防控，除给雏鸡使用活疫苗免疫外，通常还给种有永生性，可以无限地繁殖，具备比CEF细胞更大鸡注射灭活疫苗使出壳雏鸡获得母源抗体，使其避的增殖能力⋯，目前已被应用于禽类病毒的增殖、免在生命早期感染本病．鸡传染性法氏囊病灭活疫重组蛋白的表达及动物和人类疫苗的生产．鉴于传收稿日期：2011—09—03基金项目：农业科技成果转化资金项目(2008GB2D000182)作者简介：王永生，1983年生，男，河南荥阳人，硕士研究生，主要从事分子生物学及免疫学方面的研究通讯作者：王泽霖，1942年生，男，江苏苏州人，教授．第6期王永

8、生等：鸡传染性法氏囊病毒在DF．1细胞系上繁殖特性研究统工艺培养的IBDV病毒液毒价不高，需要高倍浓1．2．3不同pH值对IBDV增殖的影响取T25缩