区分野生型突变体果蝇实验.docx

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1、区分野生型和突变体果蝇实验一、【目的】1、熟悉野生型和突变体果蝇的各种性状特征。2、能够区分野生型和突变体果蝇。3、区分几种常见的突变性状;白眼(w)、残翅(vgvg)、黑檀体(ee)。二、【原理】1、果蝇的各种类型及特点:野生型灰身红眼直刚毛长翅圆眼残翅灰身红眼直刚毛残翅圆眼三隐形灰身白眼卷刚毛小翅圆眼黑檀体黑身红眼直刚毛长翅圆眼2、野生型果蝇为红眼、灰体、长翅、直刚毛。”+”突变体与野生型有明显差别:白眼其他形状与野生一样。”W”乌身又叫黑檀体,”e”残翅翅膀显著退化,部分残存,不能飞“vg”野生型突变体三、【材料】黑腹果蝇四、【方法】

2、1、培养基的配制⑴.果蝇培养基的配制配方水/ml琼脂/g蔗糖/g玉米粉/g丙酸/ml酵母粉/g①②801001.51131010100.50.50.50.5配方①可用于培养杂交果蝇,因培养基较干稠,可避免黏着果蝇.配方②可用于原种保存,因培养基较稀,可延长培养时间.两种培养基也可都用苯甲酸而不用丙酸.2、果蝇的饲养25度是其最适宜的生长温度。3、果蝇的麻醉果蝇麻醉方法1.取下培养瓶塞,将培养瓶与麻醉瓶紧密对接;2.左手握紧两瓶接口处,倒转使培养瓶向上;3.右手轻拍培养瓶将果蝇震落到麻醉瓶中;4.分开两瓶,将瓶盖各自盖好;5.将麻醉瓶的果蝇轻

3、拍到瓶底,迅速拔出塞子,滴上几滴乙醚,重新塞上麻醉瓶;6.一段时间后,观察果蝇,不再爬动,并在瓶壁上站不稳,麻醉完成。注意不能麻醉过度,如果果蝇的翅膀与身体呈45度角翘起,表明麻醉过度,不能复苏而死亡。7.将麻醉好的果蝇倒出,在一张滤纸上,观察果蝇的性状。8.将需要的果蝇用毛笔转移到一个新的培养瓶中,注意先将培养瓶平放,待果蝇苏醒后再将培养瓶直立起来,以防果蝇被新配制的略带粘稠的培养基粘住。4、果蝇的转移5、果蝇的杂交(1).选处女蝇选白眼焦刚毛小翅处女蝇8只,同时选野生型处女蝇8只。方法:将野生型和白眼焦刚毛小翅果蝇培养瓶内的成蝇全部赶去

4、,12小时内将重新孵化出的雌雄果蝇分开,即可得所需处女蝇和雄蝇。(2).杂交将白眼焦刚毛小翅处女蝇麻醉,并挑取野生型♂蝇8只麻醉后放入培养瓶,此杂交组合可用作伴性遗传和基因定位的观察统计。将野生型处女蝇8只麻醉,同时将同样数量的白眼焦刚毛小翅雄蝇麻醉,放入培养瓶,此组合用于分离定律和伴性遗传实验的反交。贴好标签。注明杂交组合和日期,学生姓名。3.25℃条件下培养7~8天后,赶去亲本蝇。(3).观察F111~13天后,F1代羽化,用放大镜对正交组合的F1进行观察,看F1雌蝇是否为野生型,雄蝇是否全为三隐性,若不是,表明处女蝇是非处女蝇,实验失

5、败。(4).F1正交选8对F1雌雄蝇麻醉,转入新的培养瓶,进行正交,贴好标签。(5).放飞F18天后赶去F1。(6).观察F212天后,F2羽化,将其麻醉后于白瓷板上用放大镜观察,或用解剖镜、显微镜观察各种表型的果蝇并统计数目,每隔2天观察一次,连续4次。统计后的果蝇倒入死蝇盛留器中。6、取亲本(处女蝇亲本)7、F1带自交8、再取亲本(F1亲本)9、根据突变性状记录结果一些常见的突变性状野生型:灰身、长翅(长度约为腹部长度的两倍)、红眼、直刚毛(头胸部以及复眼的周围具有平直,先端略弯的长型粗黑硬毛);突变体1:黑檀体、红眼、残翅、直刚毛突变

6、体2:白眼、灰身、长翅、直刚毛突变体3:小翅(长度与身体相等)、白眼、焦刚毛五、【讨论与结论】六、【作业和文献】作业1.如何鉴别果蝇的雌雄?2、如何区分野生型和突变体的要点?

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