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1、生物技术医学论坛世界连续采集兔脑脊液新方法刘冰垒1刘煜德1戎小娜2(1.广州中医药大学第一附属医院广东广州510405;2.许昌市中医院河南许昌461000)摘要:目的:探索一种连续无血污染兔脑脊液采集新技术。方法:以新西兰兔为实验对象,以冠状缝为标志,沿正中线向后1.0cm,旁开0.3cm为操作点,使用牙科钻钻孔,腰麻穿刺针穿刺置管,抽取脑脊液。结果:总成功率约94.7%。不同时间点抽取6次,均能顺利采集到脑脊液。新西兰兔的脑脊液可抽取总量大约在0.8ml-1.6ml之间。结论:此方法操作简便,成功率高,适合连续多次采集脑脊液。关键
2、词:新西兰兔钻孔置管脑脊液(CSF)连续采集技术中图分类号:R446文献标识码:A文章编号:1674-2060(2015)08-0121-01近年来,随着中枢神经系统疾病日益成为威胁人类健康的主要消毒棉球,10%水合氯醛注射液,手术辅料。疾病,TIA、急性脑血管病变等的发病率都在逐年增加,使得中药及1.3方法步骤其复方对于神经系统保护的物质基础及作用机制的研究日益兴起,①由耳缘静脉注入10%水合氯醛(3ml.kg-)。麻醉兔后,俯卧位脑脊液药理学[1]这一概念随之被提出。临床上我们迫切需要研究治固定于兔手术台上,颅顶部剪毛,消毒手术野
3、。②术者位于兔头正前疗脑血管疾病的靶向药物,因此给药后,采集、评估脑脊液(CSF)的方,以两眼外眦连线中点为起点,沿颅顶正中线用剪刀向后及左右,药物浓度,特别是连续、无血污染的脑脊液采集至关重要。大鼠、兔做“T”形剪口,向后约2.0cm,左右约1.5cm,暴露颅骨,彻底止血。此是最常用的实验动物,因大鼠脑脊液总量在580μl左右[2],且个体偏时发现冠状缝正好位于两眼外眦连线位置。③手术者左手固定头小,不适合做连续采集CSF研究。兔的脑脊液含量相对较多,平均部,以冠状缝为起点,沿矢状缝向后量取1.0cm,旁开0.3cm,记号笔1.0m
4、l左右,适合做连续采集研究,但因兔椎间隙窄,经椎间隙穿刺标记为钻孔点,以牙科钻垂直向下钻开颅骨,当见孔尖有液体渗出留取脑脊液很困难,因此,在参考了李惠勉、华峰、富宏[4-6]等研究基时即停止钻入。(注意避开已经暴露的骨皮质下血管,钻头最好为圆础上,通过直视解剖定位观察,改良了经颅钻孔、置管、定量采集脑锥形,钻入过程中保持中速,钻动过程中保持钻杆垂直勿左右晃动。)脊液的方法。④以硬膜外穿刺针垂直向下插入,深度约1.5cm,注意针体开口方向指向正后方。拔出针芯,缓慢、匀速插入硬膜外导管,深度约12.5cm。1材料和方法⑤接1ml注射器,缓
5、慢抽取,可见清澈脑脊液。分别于置管后0.5、1、1.1实验动物3、5、10、30min采集脑脊液各100μl,均能顺利抽出。⑥采集CSF完新西兰兔20只,体重2.0-2.5Kg左右,雌雄不拘,实验前禁食不毕后拔管,用蜂蜡搓成锥形封闭钻孔,缝合皮肤及皮下组织,单独放禁水6小时,实验动物均由广东省医学实验动物中心提供,许可证号置回笼喂养观察。SCXK(粤)2013-0002。1.2实验材料2结果兔手术台,硬膜外穿刺针(带真芯),硬膜外导管,手术刀,剪刀,实验过程中除1例因麻醉过量致死终止实验,1例抽出明显血性血管钳,眼科镊,牙科钻,缝针,
6、缝线,0.5mlEppendorf管,2%碘伏,脑脊液外,其余18例均在不同时间点采集到清澈脑脊液。总成功率约94.7%。按照上述不同时间点抽取6次,均能顺利采集到脑脊液。实验结束时其中4只留作观察,观察一周,进食及行为活动无明显异······下转第144页图1开窗钻孔位置正面观:冠状缝与矢状缝交界处向后1.0cm,图2置管深度及方向侧面观(插入穿刺针约1.5cm,导管约旁开0.3cm12.5cm)基金项目:国家自然科学基金项目(NO.KBC110134KC6)。作者简介:刘冰垒,男,硕士研究生,研究方向:中医药防治心脑血管疾病。通讯
7、作者:刘煜德,副主任医师,副教授,硕士生导师。BIOTECHWORLD生物技术世界121生物技术护理园地世界值,其中0表示正常;1表示轻度;2表示中度;3表示较重,4表示重度,进、更全面的方向发展,生理—心理—社会的医学模式被越来越多9表示无法评分,每个项目的最终得分为所有题目得分的平均值,得的人认可和青睐,因此护理方式的转变是必然结果。新世纪以来,社分越低说明康复效果越好,反之,康复效果越差。患者满意度采用调会发展的速度上升到前所未有的高度,人们的生活节奏越来越快,查问卷的形式进行,共分三个等级:不满意、基本满意和满意。身心承受的压
8、力也越来越大,心理疾病的发生率也随之增高。面对1.4数据处理及统计学方法不同年龄层、不同学历背景以不同家庭习惯的各类精神疾病患者,采用SPSS19.0软件对数据进行数理统计学分析,其中,计量传统的护理模式远远达不到患者的
