降解甲醛的假单胞菌菌株的固定化研究.pdf

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1、第3O卷第2期安徽工程大学学报Vo1．3O．No．22015年4月JournalofAnhuiPolytechnicUniversityApr．，2015文章编号：1672—2477(2015)02—0022—05降解甲醛的假单胞菌菌株的固定化研究高勇，顾锐，汪令翔，孔芳，蔡为荣(安徽工程大学生物与化学工程学院，安徽芜湖241000)摘要：从印染厂采集的活性污泥中筛选得到l株快速降解甲醛的菌株并命名为Wl，通过形态与生理生化特征的鉴定，初步鉴定w1菌株为假单胞菌属(Pseudomonas)．以海藻酸钠为包埋载体固定Wl菌株进行降解甲醛的初步研究，采用不同海藻酸钠浓度、菌悬液添加量

2、配制成不同的包埋载体，利用L。(3。)正交试验对w1菌株降解甲醛条件进行优化，分析其甲醛降解率的变化．实验结果表明：培养基为(NH)SO2．4g／L，MgSO·7H。OO．2g／L，微量元素母液0．1mL，pH值9．0，30℃恒温培养，在此条件下甲醛48h内的降解率达80．3．通过对甲醛降解菌w1固定化的研究，为生物法去除甲醛的应用奠定基础．关键词：固定化细胞技术；甲醛降解；假单胞菌属；降解条件中圈分类号：Xl72；X703文献标识码：A甲醛是一种来源广泛的挥发性原生毒素，有良好的水溶性，易发生化学反应，对人体健康危害性主要表现为免疫功能异常、肝肺功能异常及神经中枢系统受到影响等

3、n]，具有强烈的致畸和致癌性．在我国有毒化学品优先控制的名单上居第2位，目前国际癌症研究机构已将甲醛上升为第1类致癌物质，因此对于甲醛污染的防治对策刻不容缓，对人类健康意义重大．目前国内外报道的甲醛污染的降解治理方法有物理吸附技术、纳米光催化技术、化学反应法、臭氧负离子技术及等离子技术等，但这些方法存在药剂消耗量大、运转费用高等缺陷，限制了其普遍应用．而生物法降解甲醛尤其是降解微生物法因其具有降解效果好、工艺流程简单且无二次污染等优点，迅速成为人们寻求的重要方法之一[3]．固定化微生物技术是指通过物理或化学手段，将游离微生物细胞固定于限定的空间载体上，使其高密度并保持生物活性，在

4、适宜条件下可以增殖、反复利用的生物技术．固定化微生物技术与传统的生物处理方法相比，具有微生物生物浓度易控制、抗(耐)毒性能力强、微生物菌种流失少、反应过程易调控及效率高等优点Ee-s3．本研究以采集的印染厂长期浸泡的活性污泥中筛选到的一株可快速降解甲醛的菌株W1作为出发菌株，采用海藻酸钠法对菌株w1进行固定化包埋处理，研究合适的固定化条件，并以甲醛降解率为试验指标设计正交优化，研究各因素对固定化菌株降解甲醛的影响，为生物法去除甲醛的应用奠定基础．1材料与方法1．1试验材料从安徽芜湖中天印染厂长期浸泡的活性污泥中筛选得到的降解甲醛的菌株w1，由安徽工程大学生物与化学工程学院生技实验

5、室提供．1．2试剂与仪器乙酰丙酮，海藻酸钠，甲醛液体，冰醋酸均系上海国药集团化学试剂有限公司提供，试剂均为分析纯．TGL一16G高速冷冻离心机(上海安亭科学仪器厂)；UV一2100分光光度计(尤尼柯(上海)仪器有限公司)；HH一2、HH一6(金坛市杰瑞尔电器有限公司数显恒温水浴锅)；BS-IEA数显振荡培养箱(金坛市杰瑞尔电器有限公司)；SZ一97自动三重纯水蒸馏器(上海本波仪器有限公司)；SW—C／一2FD(苏州净化设备有限公司双人单面超净工作台)．收稿日期：2014—12一10基金项目：国家大学生创新创业训练计划基金资助项目(201410363067)；安徽省大学生创新创业训

6、练计划基金资助项目(AH201410363067)作者简介：高勇(1970一)，男，安徽滁州人，硕士研究生．通讯作者：蔡为荣(1963一)，男，安徽芜湖人，教授，硕导．第2期高勇，等：降解甲醛的假单胞菌菌株的固定化研究1．3培养基配制优化降解培养基(g／L)：KHPO3．0，KHPO4．0，MgSO·7H2O0．2，蛋白胨1．2，微量元素母液O．1mL，调pH8．O～9．0，0．68×10Pa灭菌30rain．元机盐培养基(g／L)：MgSO·7H2O0．2，(NH)SO2．4，微量元素母液0．1mL，调pH8．0，O．68×0Pa灭菌30rain．蛋白胨培养基(g／L)：蛋白胨

7、3．0，NaC110．0，调pH7．0，0．68×10Pa灭菌30min．乙酰丙酮溶液(g／100mL)：乙酸铵50g、6mL冰醋酸及0．5mL乙酰丙酮试剂溶于100mLddH2O水中，4℃冰箔保存。微量元素母液(g／L)：H3BO。6．0，ZnSO·7H2O2．0，CoC1·6H2O4．0，Na2MoO4·7H2O0．6，MnCl2·4H：O0．6，NiCI2·6H2O0．4，CuCI2·2H2O0．2．1．4实验方走(1)甲醛检测方法．甲醛的检测参照GB／T13197—199