镉对小鼠卵泡颗粒细胞凋亡的影响.pdf

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1、孝压学院学提2014DecJLiaoningMedicalUniversitv⋯．35(6)镉对小鼠卵泡颗粒细胞凋亡的影响邹小盼，郑新宇(中国医科大学第一附属医院乳腺外科，辽宁沈阳110001)摘要：目的主要研究镉对卵泡颗粒细胞凋亡和DNA完整性的影响。方法通过向培养液中添加不同浓度的CdC1使小鼠卵泡颗粒细胞处于Cd暴露的条件下，采用流式细胞术、DNALadder和台盼蓝染色的方法检测细胞的凋亡和DNA完整性。结果低浓度(5M)的CdC12处理细胞24h可引起小鼠细胞的大量死亡，高浓度(20tzM和50IxM)CdC12处理颗粒细胞12h即

2、可引起细胞的大量死亡；流式细胞术结果显示，CdCI处理颗粒细胞后，随着cd浓度的增加，无论凋亡早期、凋亡后期和死细胞所占比例都会极显著的增加(P<0．01)；Cd引起的细胞凋亡过程中伴随着DNA的片段化。结论5IxM的镉即可引起小鼠颗粒细胞的凋亡，进而可能影响小鼠卵巢的正常正理功能。关键词：CdC1；颗粒细胞；细胞凋亡；DNA完整性中图分类号：R329．2文献标志码：A文章编号：1674—0424(2014)06—0001—03EfectofCadmiumonApoptosisofMiceGranulosaCellsZOUXiaopan，ZH

3、ENGXinyu(BreastSurgeryoftheFirstAfiliatedHospitalofChinaMedicalUniversity，Shenyang110001China)Abstract：ObjectiveTostudytheeffectofcadmiumonapoptosisofmicegranulosacellsandDNAintegrity．MethodMicegranulosaceilswereexposedtocadmium(Cd)byaddingCdC12ofdifferentconcentrationsinto

4、theculturemedium．ApoptosisandDNAintegrityofgranulosacellswasdetectedbyusingflowcytometry，DNALadderandtrypanbluestaining．ResultsLowerconcen—tration(5IxM)CdC12treatedcellsfor24horhigherconcentration(20Mand50IxM)CdC12treatedgranulosacellsfor12hcouldcausemassivedeathofcells，flo

5、wcytometryresultsshowedthatwiththeincreaseofCdconcentration，theproportionofearlyapoptosis，lateapoptosis，anddeadcellswassignificantlyincreasedafterthetreatmentwithdifferentconcentrationofCdC12(P<0．01)，andmeanwhile，DNAfragmentationwasalsofoundintheprocessofapoptosisofgranulos

6、acellsinducedbyCd．Conclusion5Mconcen—trationofcadmiumcaninduceapoptosisofgranulosacellsinmice，whichmightfurtheraffectthenormalfunctionofmouseovaries．Keywords：CdC12；granulosecells；cellapoptosis；DNAintegrity镉(Cadmium，Cd)是一种重要的环境和工业同浓度CdC1，研究镉对颗粒细胞凋亡和DNA完整毒物，其生物半减期长达10～35年，被美国

7、毒物性的影响，以期为研究镉对雌性动物生殖的影响提管理委员会列为第6位危害人体建康的有毒物供理论参考。质⋯。同时，镉是一种多器官多系统毒物，被列1实验材料为一种高度可疑的环境内分泌干扰物。近年来，镉的生殖内分泌干扰作用引起了人们的广泛关1．1实验药品注。镉可直接作用于卵巢，引起卵巢积液、出氯化镉(CdC1，上海亭新制药厂)，DMEM／F血、萎缩等病变，使卵母细胞损害、成熟卵泡减少12细胞培养基和血清(Hyelone公司)，AnnexinV或空泡化、闭锁卵泡增多，干扰排卵、转运和受精—FITC细胞凋亡检测试剂盒(天津三箭公司)，动过程，引起暂时不

8、孕；还可以抑制卵巢颗粒或黄体物细胞凋亡DNALadder提取试剂盒(北京鼎国)。细胞类固醇生物合成，对雌激素受体、孕酮受体及KHPO、Na：HPO、NaC1和KC1