实验2--药物对小鼠的袪痰作用.doc

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1、实验远志对小鼠的祛痰作用小鼠气管酚红法【目的】1.学习用酚红呼吸道排泌试验来筛选祛痰药的方法。2.观察远志和氯化铵对小鼠气管酚红排泌量的影响。【原理】给小鼠腹腔注射指示剂酚红后,后者可以部分地从气管分泌排出。远志能增强呼吸道的分泌功能,从而相应增加酚红的排泌量。经碳酸氢钠溶液灌洗气管后,使灌洗液显色,用分光光度计检测OD值,查得酚红的排泌量,从而检验药物的祛痰作用。【材料】1.动物昆明种小鼠,清洁级,雌雄兼用。2.器材天平与砝码、注射器(1ml)、5号针头、7号针头、小鼠灌胃器、手术剪、眼科剪、眼科镊、蛙板、蛙钉、橡皮泥

2、、丝线、试管、721型分光光度计。3.药品1g/ml远志水煎液、氯化铵50mg/ml、0.005g/ml酚红溶液、5%碳酸氢钠溶液、1mol/L氢氧化钠溶液、生理盐水。0.005g/ml酚红溶液的配制:酚红0.5g,以1mol/LNaOH5ml溶解,加生理盐水至100ml。【方法】取6只小鼠随机分为三组,称重、标记。分别灌胃给0.2ml/10g远志水煎液、氯化铵溶液和生理盐水。30min后,分别腹腔注射酚红溶液0.1ml/10g。30min后,处死动物,解剖分离气管,于喉头下将磨平的7号针头插入气管约0.3cm,用丝线结

3、扎固定后,用1ml注射器抽取碳酸氢钠溶液0.5ml,通过针头来回灌洗呼吸道3次,最后1次将灌洗液抽出注入试管中。上述操作连续3次,共冲洗9次,抽得灌洗液约1.2~1.5ml,置于试管中,离心,用721型分光光度计、波长546nm,读取吸收度OD值。在标准曲线上查对相应的酚红浓度,比较给药组、对照组气管段酚红排泌量的差别。【结果】汇总全班实验结果,进行检验统计分析。远志对小白鼠气管段酚红排泌量的影响(±s)组别剂量(g/kg)动物数OD值气管酚红排泌量(µg/ml)远志水煎液组氯化铵溶液组生理盐水对照组【讨论】【结论】【注

4、意事项】1.酚红必须准确注入腹腔内。2.解剖操作及针头插入气管时应避免损伤血管,以免血液混入灌洗液而干扰比色。3.必须按时处死动物,及时灌洗;事先应掌握好个体间给药间隔。4.灌洗操作应轻盈连贯,抽得灌洗液量应一致。

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