南充市污水微生物絮凝剂产生菌的筛选及特性的研究-论文.pdf

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1、第29卷第9期宿州学院学报VO1．29，NO．92014年9月JournalofSuzhouUniversitySep．2014doi：10．3969／j．issn．1673—2006．2014．09．028南充市污水微生物絮凝剂产生菌的筛选及特性的研究彭兰慧，何革生，黄盖群。；高辉41．南充市嘉陵区环境监测站，四川南充，637005；2．南充市嘉陵区环境保护局，四川南充，637005；3．四川省农业科学院蚕业研究所，四川南充，637000；4．西华师范大学生命科学学院，四川南充，637002摘要：从南充市嘉东污水处理厂活性污泥中分离出一株絮凝活性较高、絮凝荆产量较

2、好的菌株(A3)，通过生理生化分析及16SrDNA序列鉴定该菌株为根瘤土壤杆茵(Agrobacteriumsp．)。对A3生长特性进行了研究，结果表明：A3菌株的最佳碳源为蔗糖，最佳氮源为尿素。在室温下，pH值为10．0时，A3茵株絮凝力最高为94．7O％；最适的金属离子、发酵液添量、发酵温度分别为Ca、2mL、30℃。关键词：微生物絮凝剂；生长特性；絮凝特性中图分类号：X172文献标识码：A文章编号：l673—2006(2O14)O9—0090一O4当前，随着人类社会的发展，水污染越来越严1．1．2培养基重。为保证水资源的可持续利用，必须解决水污染问(1)富集及筛

3、选培养基细菌培养基(LB)：蛋题，人类在水处理方面做了大量工作，开发出多种水白胨10g，酵母粉5g，NaC110g，蒸馏水1000mL，处理方法，如絮凝沉淀法、生化法、离子交换法、吸附pH7．0，121℃灭菌20rain。细菌培养基(LA)：蛋白法、化学氧化法、电渗析法和生态处理法等。在絮凝胨10g，酵母粉5g，NaCll0g，琼脂粉15g，蒸馏水1沉淀法中，絮凝剂起着非常重要的作用[1]。絮凝剂可000mL，pH7．0，121℃灭菌20rain。分为有机高分子絮凝剂、无机絮凝剂、微生物絮凝(2)发酵用培养基葡萄糖20g，KH。PO2g，剂。其中，微生物合成的具有絮

4、凝能力的生物大分K2HPO45g，NaC10．1g，(NH4)2CO31．5g，MgSO4子，不仅具有传统絮凝剂的优点，更具有传统絮凝剂·7H2O0．2g，蒸馏水1000mL，pH8．0，115℃灭所没有的优点，因此有关微生物絮凝剂方面的研究菌30rain。越来越受国内外的关注[2]。随着人们对微生物絮凝(3)碳源测试培养基碳源2O．0g／L，KHPO剂研究的不断深入，微生物絮凝剂在水处理方面的5．0g／L，KH2PO42．0g／L，NaC10．1g／L，应用范围也越来越广。微生物絮凝剂不仅具有高效、(NH)SO40．2g／L，脲0．5g／L，酵母粉0．5g／L，无

5、毒、无污染和使用条件粗放等特点，而且产生菌来MgSO40．2g／L，pH8．0，115℃灭菌3Orain。源广泛，种类多，是极具有开发价值的水处理剂。本供测试的碳源有葡萄糖、果糖、蔗糖、麦芽糖、乳研究从污水活性土壤中分离得到一株絮凝活性较糖、甘油、乙醇、淀粉。高、絮凝剂产量较好的菌株，并对其絮凝剂的产生条(4)氮源测试培养基葡萄糖2O．0g／I，件和絮凝条件以及菌株在不同培养条件和絮凝条件K2HPO45．0g／L，KH2PO42．0g／L，NaC10．1g／L，下对高岭土悬浮液的絮凝效果进行研究，为进一步氮源1．5g／L，MgSO40．2g／L，pH8．0，115℃

6、灭菌研究微生物絮凝剂的絮凝机理研究提供参考。30rain。供测试的氮源有蛋白胨、牛肉膏、酵母粉、尿素、1材料与方法谷氨酸、硝酸钾、碳酸铵、硫酸铵、硝酸铵。1．1实验材料1．1．3主要实验仪器与设备1．1．1茵种来源超净工作台、高压灭菌锅、高速离心机、恒温培实验菌种来源于南充市嘉东污水处理厂的活性养箱、恒温水浴摇床、分光光度计、冰箱、分析天平。污泥。1．2菌株的筛选与分离鉴定收稿日期：2014—05—12作者简介：彭兰慧(1983一)，女，四川隆昌人，助理工程师，主要研究方向：环境工程及环境监测。901．2．1茵种的富集传统提取细菌基因组I)NA踟方法，选择16SrD

7、NA取活性污泥约10．0g，加入无菌水100mL，摇基因通用引物序列分别为：(5一A—匀后静置15min，取上清液1mL加入到富集培养GAGTTTGATCCTGGCTCAG一3)(5一AAG—基，30C、15Or／rain培养48h后，取1mL培养液转GAGGTGATCCAGCCGCA一3)。PCR反应条件接到新的富集培养基中，相同条件下培养48h，再为：95℃预变性5min，95℃变性30S，52℃退火3O重复一次。S，72C延伸lmin，35个循环。将PCR扩增产物用1．2．2菌种的分离试剂盒纯化，送上海捷瑞生物工程有限公司测序。用无菌吸管吸取富集培养液1m