不同转移潜能人肝癌细胞系中GP73糖基化修饰水平比较-论文.pdf

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1、科技导报2014，32(16)www．kjdb．org针⋯不同转移潜能人肝癌细胞系中GP73糖基化修饰水平比较张舒’，江凯，茅晓意。，刘银坤1．复旦大学附属中山医院肝癌研究所；教育部癌变与侵袭原理重点实验室，上海2000322．复旦大学生物医学研究院癌症研究中心，上海2000323．复旦大学基础医学院，上海200032摘要利用抗体亲和层析纯化不同转移潜能人肝癌细胞系中的高尔基体蛋白73(GP73)，比较不同转移潜能人肝癌细胞系中GP73糖基化修饰水平，为GP73成为肝癌标志物提供依据。纯化的GP73通过质谱鉴定后，分别进行蛋白印迹(westernb

2、lot)和凝集素印迹(1ectinblot)分析，比较其在不同转移潜能肝癌细胞系的糖基化修饰水平。实验发现。GP73含有伴刀豆凝集素(ConA)、橙黄网胞盘菌凝集素(AAL)、小扁豆凝集素(LCA)和红腰果E型凝集素(PHA-E)识别的糖型，且单位GP73的LCA、PHA—E识别的岩藻糖和平分型糖型含量在肝癌细胞Huh7、MHCC97L、MHCC97H、HCCLM3中有升高趋势。研究表明。单位GP73岩藻糖和平分型聚糖结构随肝癌细胞的转移潜能升高而增多。关键词糖基化；人肝癌细胞系；GP73：凝集素；聚糖中图分类号R34文献标志码Adoi10．398

3、14．issn．1000-7857．2014．16．001ComparisonofGP73GlycosylationinHumanHepatocellurCarcinomaCellLineswithDifferentMetastatiCPotentialZHANGShu，JIANGKai，MAOXiaoyi，LIUYinkun’，1．KeyLaboratoryofCarcinogenesisandCancerInvasionofMinistryofEducation；LiverCancerInstitute，ZhongshanHospital，Fu

4、danUniversity，Shanghai200032，China2．CancerResearchCenterofInstitulesofBiomedicalSciences，FudanUniversity，Shanghai200032，China3．SchoolofBasicMedicalSciences，FudanUniversity，Shanghai200032，ChinaAbstractInthisstudy，Golgiprotein73(GP73)ofhepatocellulercarcinoma(HCC)celllineswithdi

5、fferentmetastaticpotentialwaspurifiedbyantibodyaffinitychromatographyandthepurificationresultwasconfirmedbyLC—MS／MS，providingmoreproofforGP73asabiomarkerforHCC．PurifiedGP73wasthenanalyzedusingwesternblotandlectinblottoobtainitsglyeosylationlevelinHCCcelllineswithdifferentmetas

6、taticpotentia1．WefoundthatglycanofGP73canberecognizedbvConA．AAL．LCAandPHA—Eleetins，whiletheLCAandPHA—E—reactivefractionofGP73wasincreasedalongwiththeincreasingmetastaticpotentialofHCCcell1ines．TheglycanlevelofGP73wasdifferentjnHCCcelllineswithdiferentmetastaticpotentia1．andthe

7、contentoffuCOSe(recognizedbyLCA)andbisectingstnlcture(recognizedbyPHA—E)increasedinagreementwiththemetastaticpotentia1．Keywordsglycosylation；hepatocellulercarcinonlacelllines；GP73；lectin；glycan收稿日期：2014—03—21：修回日期：2014—05～07基金项目：国家重点基础研究计划(973计划)项目(2011CB910604)；国家科技重大专项(2012Z

8、X10002009—007)；国家高科技发展计划(863计划)项目(2012AA020204)作者简介：张舒，研究实习员，