火麻仁油对小鼠皮肤影响综述 .doc

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1、火麻仁油对小鼠皮肤影响综述火麻仁油对小鼠皮肤影响综述火麻仁油对小鼠皮肤影响综述火麻仁油对小鼠皮肤影响综述火麻仁油对小鼠皮肤影响综述　　火麻仁为桑科植物大麻的干燥成熟种子。具有润肠通便，滋养补虚的功效，常用治疗老年虚性便秘和习惯性便秘。《神农本草经》云其“味甘、平。主补中益气，肥健不老”。现代药理研究表明，火麻仁可以从多个方面发挥抗衰老的作用［1-2］。皮肤的衰老是整体衰老的直观反映、是估价机体年龄的第一个指标，中医学和现代医学均有论述论及皮肤老化和毛发变白与衰老关系最密切，因此研究药物对皮肤老化指标的影响也是

2、评价该药物抗衰老作用的重要指标之一［3-5］。火麻仁的传统应用的记载，如《太平圣惠方》中就有“神仙服大麻子益驻颜色变鬓发延年不老方”的记载;《日华子》曰火麻仁:“补虚劳……长肌肉，益毛发，去皮肤顽痹……”。为进一步深入和更全面的研究和阐明火麻仁的抗衰老作用和机制，本文采用现代药理学方法研究了火麻仁油对皮肤老化的影响，以探讨火麻仁的整体抗衰老效应，为开发、利用火麻仁，研制防治老年病和抗衰老相关产品奠定基础。　　1材料　　药物　　火麻仁药材，经河南中医学院中药资源鉴定教研室陈随清教授鉴定为桑科植物大麻Cannab

3、isstativaL．的干燥成熟种子;七宝美髯丸由佛山德众药业有限公司生产(国药准字Z44022830，批号04007)。火麻仁油由上述火麻仁生品去皮后冷榨制得(出油率为%，比重为•mL－1)。　　试剂　　超氧化物歧化酶(SOD)试剂盒，批号20050525;脂褐质Lpf试剂盒，批号20050523，丙二醛(MDA)试剂盒，批号20050523;羟脯氨酸(Hyp)试剂盒(碱水解法)，批号20050528;考马斯亮蓝试剂盒，批号20050523。上述试剂均购自南京建成生物工程研究所。天狼星红，批号2004082

4、3，上海华硕精细化学品有限公司(Chroma进口分装);D-半乳糖，批号20030926，上海恒信化学试剂有限公司生产;三聚乙醛、冰乙酸、甲醛溶液、乙醇等均为市售分析纯。　　仪器　　JY6001型电子秤(上海精科公司天平仪器厂)，FA200KA型分析天平(上海精密电子仪器有限公司)，LD4-2型离心机(北京医用离心机厂)，D2kw-C型恒温水浴锅(北京市光明医疗仪器厂)，UV-2201分光光度计，日本岛津公司;RT-MR2100匀浆机，SwitzerlandKINEMATICAAG公司。动物昆明种小鼠，体重1

5、8～22g，雌雄各半，购自河南省医学实验动物中心(编号2003LA－014.合格证号410115)。　　2方法　　动物分组及给药　　小鼠根据性别和体重，随机分成6组，每组10只，雌雄分笼饲养，分别是:空白对照组(生理盐水组)、模型对照组(D-半乳糖组)、火麻仁油高、中、低剂量组(，，•kg－1)、七宝美髯丸(阳性对照)组(4g•kg－1)。空白对照组每天颈背部sc生理盐水(用量为10mL•kg－1)，1h后ig给予空白对照剂(取1mL吐温-80和，加生理盐水至100mL用量为20mL•kg－1)。其他5组每只

6、小鼠按10mL•kg－1sc1%D-半乳糖水溶液，1h后各给药组小鼠按20mL•kg－1ig给与不同剂量试验药物，连续42d。实验过程中，每5d各鼠称重记录1次，每日观察小鼠的皮毛色泽、饮食、饮水、大小便、精神活动情况等。末次给药2h后处死小鼠，取标本，进行各项指标的测定。　　皮肤样本的处理　　将小鼠处死立即剥皮肤，留取1g待测含水量用;其余迅速用5%硫化钠溶液脱毛后即用清水冲洗干净。取背部皮肤×大小，迅速放入10%中性甲醛液中固定，拟作组织切片进行组织形态学观察;余皮肤取下后迅速冰冻保存，拟作皮肤组织匀浆及

7、测定皮肤羟脯氨酸之用。各指标所选取材部位相同。　　指标测定　　%皮肤匀浆的制备取脱毛皮肤组织，经预冷生理盐水漂洗，除去皮下脂肪和其他结缔组织，滤纸拭干，称重，量筒量取该组织块9倍质量预冷生理盐水，用匀浆机制成10%组织匀浆(在低温环境中使组织细胞完全破碎，显微镜下观察内容物全部游离在液相中)。　　各项指标的测定测皮肤匀浆中Lpf，SOD，MDA，Hyp含量或活力，均根据测试盒所附方法、步骤测定。　　皮肤中水分含量的测定采用烘干法按的方法取1g左右皮肤，精密称取湿重后置烘箱中，于80℃烘干12h，称其干重，计算

8、皮肤含水量。　　皮肤组织病理学形态观察取小鼠脱毛皮肤，固定于10%的甲醛溶液中，脱水、石蜡包埋、切片。HE染色法染色，于光镜下观察表皮及真皮厚度、毛孔及毛囊的状态变化。　　统计学处理数据分析采用软件包，计量资料数据以x珋±s表示，组间比较采用单因素方差分析。P＜有统计学意义。　　3结果　　对衰老模型小鼠皮肤组织匀浆中SOD，MDA，Lpf的影响与空白对照组相比，模型组小鼠皮肤匀浆中SOD活力均显著下