苏州大学有机化学实验-糖、氨基酸、蛋白质的性质.doc

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1、苏州大学化学化工学院课程教案[实验名称]糖、氨基酸、蛋白质的性质[教学目标]知识与技能:理解并掌握糖、氨基酸、蛋白质的性质,用简单的化学方法区别单糖和双糖、还原性糖和非还原性糖,掌握鉴别氨基酸、蛋白质的实验方法。[教学重点]区别单糖和双糖、还原性糖和非还原性糖,用简单的化学方法鉴别氨基酸、蛋白质。[教学方法]讲演法,比较法,归纳法[教学过程][引言]【实验目的】本次的实验内容是糖、氨基酸、蛋白质的性质。通过实验,要掌握简单的化学方法区别单糖和双糖、还原性糖和非还原性糖、掌握鉴别氨基酸、蛋白质的实验方法。[讲述]糖的性质实验一:Mol

2、ish试验—α-萘酚试验出糖[1]在试管中加入1mL5%葡萄糖,滴入2滴10%α-萘酚和95%乙醇溶液,将试管倾斜45o,沿管壁慢慢加入1mL浓硫酸,观察现象?若无颜色,可在水浴中加热,再观察。试样:5%葡萄糖、果糖、麦芽糖、蔗糖。[讲述]糖的性质实验二:间苯二酚试验[2]在试管中加入间苯二酚2mL,加入5%葡萄糖溶液1mL,混匀,沸水浴中加热1-2min,观察颜色有何变化?加热20min后,再观察,并解释。试样:5%葡萄糖、果糖、麦芽糖、蔗糖[讲述]糖的性质实验三:Fehling试剂、Tollen试剂检出还原糖(1)与Fehlin

3、g试剂反应:Fehling试剂A和B各3mL,混匀后等分6份分别置于6支试管中,标名号码。加热至沸,分别滴入试样0.5mL,观察并比较结果。试样:5%葡萄糖、果糖、麦芽糖、蔗糖、乳糖、淀粉(2)与Tollen试剂反应:取6支洁净的试管分别加入1.5mLTollen试剂,分别加入试样,在60-80oC热水浴中加热,观察并比较结果,解释为什么?试样:5%葡萄糖、果糖、麦芽糖、蔗糖、淀粉液。[讲述]糖的性质实验四:糖脎的生成取2支试管分别加入2mL苯肼试剂,分别加入5%葡萄糖和乳糖,沸水浴中加热,观查晶体形成及所需时间[3]。[讲述]糖的

4、性质实验五:糖类物质的水解(1)蔗糖的水解:取1支试管加入8mL5%蔗糖并滴加2滴浓盐酸,煮沸3-5min,冷却后,用10%NaOH中和,用此水解液作Fehling试验。(2)淀粉水解和碘试验碘试验:向1mL胶淀粉中加入9mL水,充分混和,向此稀溶液中加入几滴碘-碘化钾溶液,将其溶液稀释,至蓝色很浅。加热,结果如何?放冷后,蓝色是否再现,试解释之[4]。[讲述]氨基酸、蛋白质的性质实验一:蛋白质的沉淀(1)用重金属盐沉淀蛋白质[5]:取两支试管,标名号码,各盛1mL清蛋白溶液,分别加入饱和的硫酸铜、碱性醋酸铅2-3滴,观察有无蛋白质

5、沉淀析出。(2)蛋白质与生物碱试剂反应[6]:取一支试管,加入0.5mL蛋白质溶液,并滴加5%的醋酸使之呈酸性,然后加入饱和的苦味酸溶液,直到沉淀发生为止。[讲述]氨基酸、蛋白质的性质实验二:蛋白质的颜色反应(1)与茚三酮反应[7]:在两支试管中分别加入1%的甘氨酸和鸡蛋白溶液各1mL,再分别滴加茚三酮试剂2-3滴,在沸水浴中加热10-15min,观察有什么现象?(2)蛋白质的二缩脲反应[8]:取1-2mL20%氢氧化钠溶液放在试管中再加1滴硫酸铜溶液(饱和硫酸铜溶液与水按1:30予以稀释),加入1mL清蛋白,共热,现象如何?是否由

6、于蛋白质与硫酸铜生成了络合物而呈紫色?取1%甘氨酸溶液作对比试验,此时仅有氢氧化铜沉淀析出。【注释】[1]Molish反应可能是糖类物质先与浓硫酸反应生成糠醛衍生物,后者再与a-萘酚反应生成紫色络合物。反应式见课本P182。[2]酮糖与间苯二酚溶液生成鲜红色沉淀。它能溶于乙醇呈鲜红色。但加热过久,葡萄糖、麦芽糖、蔗糖也呈正性反应。这是因为麦芽糖或蔗糖在酸性介质中水解,分别生成葡萄糖或葡萄糖和果糖。葡萄糖浓度高时,在酸存在下能部分地转化成果糖。[3]教师参考数据:葡萄糖5min;乳糖20min,且乳糖脎溶于热水,直到溶液冷却才析出沉淀

7、。[4]碘遇淀粉变蓝的实质是直链淀粉的螺旋状圆柱刚好能容纳碘分子钻入并吸附成包含物。[5]重金属在浓度很小时就能沉淀蛋白质,与蛋白质形成不溶于水的类似盐的化合物。因此蛋白质是许多重金属中毒时的解毒剂。用重金属盐沉淀蛋白质和蛋白质加热沉淀均是不可逆的。[6]生物碱沉淀剂多为重金属盐,大分子酸及相对分子质量较大的碘化物复盐,生物碱沉淀剂也可以使蛋白质产生沉淀。[7]茚三酮水合物结构、配制以及使氨基酸、蛋白质显色原理参见课本P184-185。鸡蛋白溶液需要较长时间加热。[8]任何蛋白质或其水解中间产物均有二缩脲反应。这表明蛋白质或其水解中

8、间产物均含有肽键。在蛋白质水解产物中,二缩脲反应的颜色与肽键数目有关,一般说来:含一个肽键显蓝色;两个肽键显紫色;三个肽键显红色。蛋白质在二缩脲反应中常显紫色,说明缩三氨基酸的残基在蛋白质分子中较多。显色反应是由于生成了铜的络合物。操

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