基因重组葡萄糖异构酶工程产业化项目资金申请报告(已成功申请国家补助资金)

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1、基因重组葡萄糖异构酶工程产业化项目资金申请报告第一章项目的意义和必要性第一节国内外现状和技术发展趋势一、国内外现状葡萄糖异构酶（GlucoseIsomerase，简称GI），能将D-木糖、D-葡萄糖、D-核糖等醛糖转化为相应的酮糖，工业上主要用作果葡糖浆生产的催化剂。1967年，美国首次成功的进行了葡萄糖异构酶的工业化应用，至今国外的果葡糖浆生产业均已转向葡萄糖异构酶技术。由于葡萄糖异构酶结构稳定，是目前世界上公认的研究酶的催化机制、建立完整的蛋白质工程技术的最好模型之一，具有巨大的经济价值和理论研究意义，国外投入了大量的人力、物力对葡萄糖异构酶的酶学性质、固

2、定化工艺、基因工程、晶体学及其蛋白质工程进行了系统的研究。如比利时的植物遗传所、荷兰细菌遗传公司（Gist-brocades）、英国帝国理工学院生物工程中心、美国加州Cetus以及Amgen公司、加拿大及日本的一些研究机构等。国内自六十年代起已开展了葡萄糖异构酶应用于果葡糖浆生产的研究，山东省食品发酵工业研究设计院通过诱变筛选获得的7号淀粉酶链霉菌M1033菌株，是国内在这方面最具应用价值的工业菌株之一。目前国内外71基因重组葡萄糖异构酶工程产业化项目资金申请报告主要是通过诱变筛选等手段来获得生产用菌株，中国科学技术大学生命科学学院是国内唯一开展葡萄糖异构酶的

3、蛋白质工程的研究单位。自国家“八六三”项目“葡萄糖异构酶的蛋白质工程”立项以来，项目组的研究人员对葡萄糖异构酶的催化机理及其蛋白质工程进行了多年的研究和探索。经十五年科技攻关，目前已完成葡萄糖异构酶的蛋白质工程改造，获得性质改良的基因重组葡萄糖异构酶；并利用基因工程方法构建高表达量的基因重组链霉菌工业生产菌株，获得了具有完整自主知识产权的同源重组基因工程菌株M1033WZ，其技术水平及工业应用价值在国内外处于领先水平。目前项目共获得3项国家发明专利：“SM33GI的突变酶GIG138P及一种提高GI热稳定性的突变方案”（专利号ZL95112782.9）、“一种

4、葡萄糖异构酶的247位单突变体酶和138，247位双突变体酶及其构建方法”（专利号ZL97119714.8）、“表达M1033GI的突变酶GIG138P的基因工程菌株M1033WZ及其构建方法”(专利号：ZL02143031.4)，其中“表达M1033GI的突变酶GIG138P的基因工程菌株M1033WZ及其构建方法”已获得PCT国际专利受理。（见附件4-6、4-7、4-8、4-9、4-10、4-11）葡萄糖异构酶市场方面，目前我国还没有自己的葡萄糖异构酶生产企业，国内市场完全由丹麦诺维信公司所垄断，其产品均为进口分装，目前国内市场销售价约为38万元/吨。二、

5、我国酶制剂产业现状196571基因重组葡萄糖异构酶工程产业化项目资金申请报告年，中国第一家酶制剂专业生产企业在无锡市成立，标志着中国酶制剂工业的起步，40年来，我国酶制剂产业从无到有，至今已具有一定规模。目前我国酶制剂生产企业约100家，但均为中小型企业，现有年生产能力约40多万吨，已实现工业化生产的酶种有20多种，主要集中在糖化酶、淀粉酶、蛋白酶等三大类，大部分企业生产水平仅达到90年代末国际水平。我国酶制剂生产厂家主要产品大多停留在技术含量低、利润率低的产品上，如目前市场上5万单位糖化酶工厂成本约4400元/吨，售价仅为4600元/吨，2000单位中温淀粉

6、酶工厂成本约7000元/吨，售价仅为8000元/吨，10万单位蛋白酶工厂成本约7200元/吨，售价仅为8100元/吨。同时许多工业生产急需的酶种如葡萄糖异构酶、普鲁蓝酶、真菌淀粉酶、乳酸酶、溶菌酶等又需大量从国外进口，这种情况既严重影响了我国酶制剂行业的健康发展，又增加了下游生产行业的生产成本。在当前的市场情况下，安徽*****生物技术有限公司紧抓机遇，依托中国科学技术大学的技术优势，生产科技含量高、技术壁垒高的基因重组葡萄糖异构酶，并将进一步发展多种高技术含量的酶种如普鲁兰酶、碱性蛋白酶、啤酒复合酶、真菌淀粉酶、乳酸酶、溶菌酶等，并争取以此带动国内的酶制剂生

7、产企业赶上国外同行业水平。71基因重组葡萄糖异构酶工程产业化项目资金申请报告1991-1998年中国各类酶制剂的产量、总产量和销售情况单位：千吨/百万元表1-11991年1992年1993年1994年1995年1996年1997年1998年α-淀粉酶11.6513.9820.0024.8830.8935.0032.0038.00糖化酶67.8274.2674.8093.44125.11160.00150.00138.00蛋白酶12.8314.9915.0227.4340.0245.0038.0040.00其它酶0.130.050.26-0.29--5.00总产

8、量92.33100.33110.101