低密度脂蛋白胆固醇测定方法的选择.pdf

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1、l18世界最新医学信息文摘2014年第14卷第6期·医学检验·低密度脂蛋白胆固醇测定方法的选择李霞，沈恩英(内蒙古呼伦贝尔市根河市金河中心卫生院，内蒙古呼伦贝尔022359)摘要：目的探讨血清低密度脂蛋白胆固醇测定方法。方法通过分析聚乙烯硫酸沉淀法和匀相测定法检测低密度脂蛋白胆固醇的原理、试剂、操作方法和临床意义，选择一种更好的检测方法。结论以上两种方法均能有效对低密度脂蛋白胆固醇进行测定。关键词：低密度脂蛋白胆固醇；测定；方法中图分类号：R446文献标识码：BDOI：10．3969~．issn．1671—3141．2014．06．0861概述／L)=T—C(mmol／L)一}LDL—

2、C(mmol／L1。低密度脂蛋白胆固醇是血清中携带胆固醇的主要颗粒，2．5临床意义主要由极低密度脂蛋白胆固醇分解而来，低密度脂蛋白直LDL增高是动脉粥样硬化发生发展的主要脂类危险接向组织和细胞内运输胆固醇，因此LDL增高是动脉粥样因素。过去只测TC估计LDL—C水平，但TC水平也受硬化发生发展的主要脂类危险因素，其血清水平越高，发HDL—C水平的影响。故最好采用LDL—C代替TC作为动脉生动脉粥样硬化的危险性越大。粥样硬化性疾病的危险因素指标。美国国家胆固醇教育计直接测定血清(或血浆)LDL—C的经典方法是超速离心划成人治疗专业组规定以LDL—C水平作高脂蛋白血症的治分离LDL，或超速

3、离心(去除VLDL)结合沉淀法，均非一疗决策及其需要达到的治疗目标。般实验室所能采用。电泳分离LDL的方法也不够简单。十3匀相测定法多年来发展起来的简单方法有两类：一类是用化学法分离3．1原理VLDL，然后测定HDL与LDL部分的胆固醇，减去HDL—C基本原理有如下几类。得LDL—C；另一类是选择沉淀LDL法。该法在LDL沉淀3．1．1增溶法(SOL法)后，可测出上清液的HDL+VLDL部分的胆固醇，然后计算VLDL、CM和HDL由表面活性剂和糖化合物封闭。出LDL—C，或直接取沉淀物测定LDL—C，这类方法有3种LDL—c+表面活性剂+CEH和COD一胆甾烯酮+H，O，。沉淀剂：①肝

4、素一枸橼酸；②聚乙烯硫酸；③多环表面活H，O，+4一AAP+POD+HSDA苯醌胺色素。化阴离子(法国试剂盒，未具体指名化学名称)。目前多用3．1．2表面活性剂法(SUR法)PVS沉淀法，美国LRC各实验室也统一采用此法(BoehringerVLDL、CM和HDL+表面活性剂I+CEH和COD一胆试剂盒)。但国内还很少用LDL—C直接测定，而是用甾烯酮+H2O2。H2O2+POD清除H202，无色。LDL—c+Friedewald公式用TC、TG、HDL—C3项测定计算LDL—C，表面活性剂1I+CEH和COD一胆甾烯酮+H02。H202+4一不如直接测定法可靠。新近，中华医学会检验学

5、会已推荐AAP+POD+HSDA一苯醌亚胺色素。匀相法作为临床实验室测定LDL—C的常规方法。3．1．3保护法(PRO)2聚乙烯硫酸沉淀法LDL+保护剂，保护LDL不被酶反应。非LDL—C+CEH2．1原理和COD—H202+过氧化氢酶一H2O。用聚乙烯硫酸(PVS)选择沉淀血清中LDL，测出上清液LDL—c+去保护剂+CEH和COD一胆甾烯酮+H2O2。中的胆固醇代表HDL—C与VLDL—C之和，所以TC减去上H202+4一AAP+POD+HDAOS_显色。清液胆固醇即得LDL—C值。试剂中含EDTA用以除去两价3．1．4过氧化氢酶法(CAT法)阳离子，避免VLDL共同沉淀。适量的中

6、性多聚物(聚乙二非LDL—C+非离子表面活性剂+CEH和COD一胆甾醇独甲醚PEG—ME)用以加速沉淀。胆固醇测定同TC测定。烯酮+H2O2。202+过氧化物酶一H2O2。LDL—C+离子型表2．2试剂面活性剂+CEH和COD一胆甾烯酮+HO：。过氧化氢酶2．2．1’沉淀剂+NaN一抑制。H2O2+4一AAP+POD+HSDA一苯醌亚胺色素。每100ml中含PVS钾盐70mg，EDTA—Na2·2H2O3．1．5紫外法(CAL法)186mg及PEGME16ml，可在4℃冰箱存放，至少稳定3LDL+Calixarene可溶聚合物。非LDL—C+CE和CO+个月(DEGME为黏稠液体，要确

7、保加量准确)。肼一胆甾烯酮腙。LDL—c+去氧胆酸+B—NAD+CEH和2．2．2酶试剂CH一胆甾烯酮腙+B—NADHO。同TC测定。3．2试剂2．2．3参考标准方法不同，试剂组成亦各不相同，现将增溶法的组成介同TC用定值血清。绍如下。试剂l：MOPS缓冲液50mmol／L，pH6．75；O／-一2-3操作环状葡聚糖硫酸盐0．5mmol／L；硫酸葡聚糖0．5g／L；用早晨空腹血清，如在4℃存放不得超过4天，深低温MgC122mmol／L；EMS