亚热带型EGFP荧光绿茧转基区家蚕品系杂交组配试验.pdf

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1、2013年第50卷第4期《广西蚕业》GuangxiSeficultureVo1．50No．4，2013亚热带型EGFP荧光绿茧转基因家蚕品系杂交组配试验张雨丽，张桂征，黄玲莉，闭立辉，赵爱春2(1．广西蚕业技术推广总站，南宁市530007；2．西南大学家蚕基因组生物学国家重点实验室)[摘要]为探索EGFP荧光绿茧转基因家蚕品系与常规品种进行杂交时，其F代的EGFP外源基因在杂交过程中的表达量和稳定性，笔者利用创新育成的亚热带型EGFP荧光绿茧转基因家蚕品系进行杂交组配测试。结果表明：转EGFP家蚕品系与常规白茧品种杂交，外源基因的表达情况有差异，

2、造成绿茧比率各不一样；但利用已经纯合、外源基因表达量高的转EGFP家蚕新品系进行品系间二元杂交，其F。绿茧率高达100％；与常规白茧品种进行二元杂交测试，其F代绿茧率高达90％以上；与常规白茧品种进行三元杂交测试，其F代大多组合的绿茧率达到75％以上；测试杂交组合的结茧率、全茧量及茧层率等主要经济性状与两广二号相仿。[关键词]转基因；家蚕品系；杂交组配[中图分类号]S882．2；[文献标识码]A；[文章编号]1006—1657(2013)04—0001—6转基因育种技术由于具有育种周期短、目的性强、可突破不同物种间基因难以重组的难题等优点[13，

3、成为了新兴的育种技术。但应用现有的转基因技术制备出的转基因个体，通常要经过选育才能够形成具有综合经济性状优良的品种，在生产上推广应用。研究发现，通过杂交、转育的方法，将常规白茧家蚕品种932、7532与转EGFP基因家蚕品系进行杂交，可将外源基因导人常规蚕品种932、7532中，有效改良转EGFP家蚕素材的经济性状[2]。为探索EGFP荧光绿茧转基因家蚕品系与常规品种进行杂交时，其F的外源转入EGFP基因在杂交过程中的表达量、配合力和杂交优势等，笔者利用创新形成的亚热带型EGFP荧光绿茧转基因家蚕品系进行杂交组配测试，为转基因家蚕品系实用化奠定基

4、础。1材料与方法1．1试验材料常规蚕品种：932、芙蓉、7532、C，为广西蚕业技术推广总站保育的二化含多化血统普通白茧家蚕品种。芙蓉·932、932·芙蓉、两广二号为广西蚕业技术推广总站提供。转基因蚕品系：西绿一BB、西绿一DT，为广西蚕业技术推广总站从西南大学引进的转绿色荧光蛋白基因的家蚕品系，茧色在自然光下呈绿色，且具有绿色荧光特性。[收稿日期]2013—10—12；[修回日期]2013—10—19[项目资助]广西科学研究与技术开发计划项目(No．桂科攻10100005—12)。为通讯作者。2013年第50卷第4期《广西蚕业》Guangxi

5、SericultureVo1．50No．4，2013亚热带型转基因蚕品系：932·西绿一B、7532·西绿一BB、7532·西绿·西绿一BB、C·西绿一BB、932·西绿一DT为广西蚕业技术推广总站转育形成的亚热带型EGFP荧光绿茧转基因蚕品系。1．2试验方法1．2．1亚热带型EGFP荧光绿茧转基因家蚕新品系的育成与纯化方法采用广西现行优良亚热带蚕品种——932、7532、c等为受体材料，以广西蚕业技术推广总站引进，并进行了纯化改良后的EGFP基因高量表达的荧光绿茧转基因蚕育种素材——西绿为载体材料；采用杂交、回交、转育等育种方式，将外源的EGF

6、P基因导入广西现有的亚热带强健性优良品种中。继而进行茧色等综合经济性状的纯化和改良提高[2]。1．2．2多元杂交组合的试验方法选用外源基因表达量较高、茧色基本稳定的亚热带型EGFP荧光绿茧转基因家蚕品系“932·西绿一BB”、“7532-西绿·西绿一BB”等与常规白茧品种杂交，制备杂交种。收蚁时每个组合分别收蚁1．0g，饲育到3龄止桑后到4龄饷食一足天内，分成3区蚕，每区300头，作为4龄起蚕基本蚕头数。多余的蚕作为预备区饲养，如发现试验区有封口蚕、半脱皮蚕等异常蚕儿，从预备区中进行等量调换，但4龄饷食一足天后不再进行调换。每一个杂交组合分出3区

7、蚕，分区上蔟、采茧、茧质调查、统计成绩，最后求得杂交组合的平均值，文中绿茧均为荧光绿茧的简称。1．2．3柱形图采用Excel2003自动生成。2结果与分析2．1亚热带型EGFP荧光绿茧转基因家蚕新品系的建立选用表达量高的“西绿”优良个体作为父本与现行的亚热带优良品种932、7532、C等进行杂交，将外源的EGFP基因导入广西现有的亚热带强健性优良品种中，创新形成“932·西绿一BB”、“7532·西绿一BB’'、“C·西绿一BB”、“7532·西绿·西绿一BB，，和“932·西绿一DT”等亚热带型EGFP荧光绿茧转基因家蚕新品系。继而对各个品系进

8、行茧色等综合性状的纯化提高，不同品系各个世代EGFP基因的表达情况(即绿茧率)见表1。表1亚热带型EG荧光绿茧转基因家蚕杂交品系各世代的