选修3基因工程复习

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1、选修3现代生物科技专题专题1基因工程基因工程是指按照，进行严格的设计，并通过DNA重组和转基因等技术，赋予生物以新的遗传特性，从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。由于基因工程是在水平上进行设计和施工的，因此又叫做。一、基因工程的概念人们的意愿体外DNA重组技术DNA分子操作环境操作对象操作水平基本过程结　　果生物体外基因DNA分子水平剪切拼接导入表达人类需要的基因产物(定向改造生物遗传特性)实质：基因重组基因工程的特点：将抗虫基因移植到棉花的细胞中，使棉花具有抗虫害的作用。假如你作为一名研究者来完成这一项工作，那么你会遇到哪些困难或需要

2、解决哪些问题呢？1、如何将抗虫基因（目的基因）从某种生物的DNA上切割下来？2、如何使抗虫基因（目的基因）与棉花的DNA连接起来？想一想基因工程培育抗虫棉的简要过程：苏云金芽孢杆菌(有抗虫特性)普通棉花(无抗虫特性)抗虫基因与运载体DNA拼接导入棉花细胞(含抗虫基因)棉花植株(有抗虫特性)提取通过观察抗虫棉的培育过程，你认为关键的步骤是什么？关键步骤一：抗虫基因从苏云金芽孢杆菌细胞内提取。关键步骤二：抗虫基因与运载体DNA连接。关键步骤三：抗虫基因进入棉细胞。通过观察抗虫棉的培育过程，你认为关键的步骤是什么？工具：基因的剪刀——限制性内切酶工具：基因

3、的针线——DNA连接酶工具：基因的运输工具——运载体二、基因操作的工具1、基因的剪刀——限制性内切酶2、基因的针线——DNA连接酶3、基因的运输工具——运载体1.2.1限制性核酸内切酶1.来源：主要是从中分离纯化出来的。2.功能：能够识别双链DNA分子的某种核苷酸序列，并且使每一条链中部位的两个核苷酸之间的断开，因此具有性。特定原核生物特定磷酸二酯键特异现在已知的核酸限制性内切酶均不能切割RNA3.识别序列：定义：限制性内切酶在双链分子上能识别的特定核苷酸序列。又称为识别位点、切割位点或靶位点。长度：大多数限制酶的识别序列由个核苷酸组成。也有4、5或

4、8个核苷酸的。结构特点：具有双重旋转对称结构，即：回文结构。ABCNC’B’A’A’B’C’NCBAABCC’B’A’A’B’C’CBAABB’A’A’B’BA6经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式：和。前者是限制酶在它识别序列的将DNA的两条链切开产生的，后者是限制酶在它识别序列的切开产生的。黏性末端平末端中心轴线两侧中心轴线GAATTCGCTTAAAATTCG限制酶切割DNA分子示意图CTTAAG黏性末端EcoRⅠCCCGGG限制酶切割DNA分子示意图GGGCCC平末端SmaⅠCCCGGGGGGCCC1.不同DNA分子用同一种限制酶切割

5、形成的黏性末端都相同；2.同一个DNA分子用不同限制酶切割，产生的黏性末端一般不相同；3.不同限制酶切割形成的黏性末端，如互补则可以相互重新配对。1：下列关于限制酶的说法正确的是（）A.限制酶广泛存在于各种生物中，但微生物中少B.一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列C.不同的限制酶切割DNA后都会形成黏性末端D.限制酶的作用部位是特定核苷酸形成的氢键B2.现有一长度为3000个碱基对(bp)的线性DNA分子，用限制酶切后，进行凝胶电泳，使降解产物分开。用酶H单独酶切，结果如图1。用酶B单独酶切，结果如图2。用酶H和酶B同时酶切，结果如图3。该DNA

6、分子的结构及其酶切图谱是()A3.限制酶是一种核酸切割酶，可辨识并切割DNA分子上特定的核苷酸序列。如图为四种限制酶BamHⅠ，EcoRⅠ，HindⅢ以及BglⅡ的辨识序列。箭头表示每一种限制酶的特定切割部位，其中哪两种限制酶所切割出来的DNA片段末端可以互补黏合，其正确的末端互补序列应该为:A.BamHⅠ和EcoRⅠ；末端互补序列-AATT-B.BamHⅠ和HindⅢ；末端互补序列-GATC-C.EcoRⅠ和HindⅢ；末端互补序列-AATT-D.BamHⅠ和BglⅡ；末端互补序列-GATC-D4.一环状DNA分子，设其长度为1。限制性内切酶A在其

7、上的切点位于0.0处；限制性内切酶B在其上的切点位于0.3处；限制性内切酶C的切点未知。但C单独切或与A或B同时切的结果如下表，请确定C在该环形DNA分子的切点应位于图中的:A.0.2和0.4处B.0.4和0.6处C.0.5和0.7处D.0.6和0.9处A1。分类：根据酶的来源不同，可分为两类：一类是从中分离得到的，称为连接酶；另一类是从中分离出来的，称为连接酶。1.2.2基因的的针线——DNA连接酶大肠杆菌E.coliDNAT4噬菌体T4DNA2。两种DNA连接酶的比较：（1）相同点：都缝合键。（2）区别：E·coliDNA连接酶只能将双链DNA片

8、段互补的之间连接起来，而不能将双链DNA片段之间进行连接；而T4DNA连接酶既可以“缝合”双链DNA片段互补