胰岛素酶联免疫分析方法的建立

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1、第!"卷第%期同!位!素8,19!"!:,9%!""’年!月+,-./01,234,5,674;7<9!""’人胰岛素酶联免疫分析法的建立贾娟娟!刘一兵!陈!键!许文革!官国英!韩世泉"中国原子能科学研究院同位素研究所$北京!%"!)%&#摘要!采用两株抗胰岛素单克隆抗体$一株包被聚苯乙烯板%另一株标记辣根过氧化物酶$建立了测定人胰岛素的双抗体夹心酶联免疫分析法&方法学研究表明$本方法的灵敏度为%9’=3f’>$曲线范围(!%#"=3f’>$批内%批间变异系数分别小于%%@%%(@$回收率*#9)@!%%%9%@!高浓度胰岛素血清样品系列倍比稀释后测定$

2、测定值与稀释度呈线性相关$相关系数"9**U!&U例健康人血清样品测定值为&9#!%"9U=3f’>&该方法与人胰岛素放射免疫分析法测定结果的相关性良好$*Z"9*’&关键词!胰岛素!单克隆抗体!酶联免疫分析!放射免疫分析中图分类号!^&*!$&&!jU%)9*!!文献标识码(B!!文章编号(%"""$’(%!"!""’#"%$""!)$"(@R#P1)’./*1RA#,)+-’,P,V6A#M*,X#20AAJ,+1+(.#,)311’6-+(0,1J/*,+3B+-0/$c-0/$>3fbD$

3、,$ID/H$CB:TFD$K-0/"<(B#*-2($-/0,)/-/B($1"&$#,$)-&-.-(/0C-/2&+D$(*%5$E(&F&$%%"!)%&$1"&$##3.1)(’4)(AJ,=,/,G1,/010/5D<,?D740H0D/45D/4-1D/0.70661D7?D/5J,$4D577/LI=71D/P7?D==-/,4,.<7/50440I"O>3TB#9E/7,25F70/5D<,?D74D4D==,

4、ND5I,25F70440ID4%9’=3f’>0/?5F7.7$G,N7.ID4*#9)@!%%%9%@9AF7D/5.0$0/?D/57.0440IQ80.7<71,J%%@0/?%(9"@.7$467G5DN71I9AF7G,..7105D,/G,722DGD7/5<75J77/=704-.7?0/?G1D1-57?N01-74D4"9**U0257.47.D01?D1-5D,/4,25F740=6174-4D/HFDHFG,/G7/5.05D,/,2D/4-1D/9AF7N01-72,./,.=0140=6174"$Z&U#D4&9#!%"9U=

5、3f’>9Q,=60.7?JD5F^3B$5F7G,..7105D,/G,722DGD7/5D40GG7650<17"*Z"9*’#95#67+(21(D/4-1D/!=,/,G1,/010/5D<,?I!7/LI=7$1D/P7?D==-/,4,.<7/50440I!.0?D,D=$=-/,0440I)%*!!糖尿病"]D0<7574M711D5-4$]M#是一种多发展%预后及制定适当的治疗方案非常重要&)!*病因的代谢性疾病$特点是慢性高血糖%伴随因%*(*年b011,J等首次应用放射免疫分析法胰岛素分泌减少或作用缺陷引起的糖%脂肪和蛋测定胰岛素&)

6、"余年来$胰岛素的免疫测定方白质代谢紊乱&糖尿病在我国及全世界发病率法有了很大改进$为避免放射性的使用$酶联免)&!#*都很高$并发症问题也非常严重&临床诊断中$疫分析%发光免疫分析等先后发展起来&在血液胰岛素含量的测定对于了解糖尿病的发生%实际应用中$与放射免疫分析方法相比$酶联免收稿日期!!""#$"#$!%!修回日期!!""#$%%$%#作者简介!贾娟娟"%*’*!#$女"汉族#$河南人$硕士$免疫分析专业!第%期!!!!!!!!!!!贾娟娟等%人胰岛素酶联免疫分析法的建立!(!’"疫分析也显示出了众多的优越性#由于受血!:9!人胰岛素标准品的配制

7、液中胰岛素不均一性的影响$采用双抗体夹心法胎牛血清(#V灭活)F$&""".*=D/离心的酶联免疫分析较放免法测定胰岛素的特异性!"=D/后$上清液用于配制标准品#将不同量!U$*"增高$因此$本工作拟建立人胰岛素酶联免的人胰岛素加入到灭活后的胎牛血清中$配制胰疫分析方法#岛素浓度分别为(’%"’!"’)"’U"’%#"=3f*>的标准品$用胰岛素放射免疫分析试剂盒(分析灵8!实验材料敏度%9(=3f*>$检测范围"!%#"=3f*>)校T67G5.0酶标仪%奥地利T>A公司产品&*#正该标准品的浓度#校正后的标准品以"9(=>孔酶标板%美国Q,450.

8、公司产品&抗胰岛素单克分装$冻干$于!!UV保存#隆抗体分别由_D,?74DH/