宫颈癌患者人乳头瘤病毒(HPV)主要型别及其感染研究.pdf

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1、第21卷第4期病毒学报Vol.21No.42005年7月CHINESEJOURNALOFVIROLOGYJuly2005宫颈癌患者人乳头瘤病毒（HPV）主要型别及其感染研究吴玉萍1，陈裕隆1，李隆玉2，梁增文1，张雁玲2（1.中山大学生命科学学院，广州510275；2.江西省妇幼保健院，南昌330046）摘要：本文探讨了江西省和广东省宫颈癌患者人乳头瘤病毒（HumanpapillomaVirus，HPV）感染及其型别分布，分析了高危型HPV对各种宫颈病变的感染情况，为宫颈癌的早期发现和临床诊治提供科学依据。首先采用细胞学、HP

2、VDNA检测（第二代杂交捕获法，HC2）、电子阴道镜和宫颈化学着色方法筛查宫颈癌患者，经病理镜检确诊，然后用GPPCR-SBT法对宫颈癌患者进行HPV基因分型。江西省溪口镇、古市镇及修水县城宫颈癌癌前病变发生率为5.7%。HC2方法发现宫颈癌患者13种高危型HPVDNA阳性率为89.9%，宫颈上皮内瘤样病变的为84.8%，对照组为24.5%。采用GPPCR-SBT方法进行基因分型发现，江西省宫颈癌患者存在HPV16、58、31、33、18、66、6、11、56和81十种型别，其中HPV81型在国内外鲜有报道。据此提出生殖道高危

3、型HPV感染是妇女宫颈癌发病的重要因素，并发现江西省宫颈癌高发区妇女高危型HPV感染率为24.5%。建立了HPV基因分型的方法，对HPV致宫颈病变的分子机制进行了分析。关键词：宫颈癌；人乳头瘤病毒（HPV）；第二代杂交捕获法；GPPCR-SBT；基因分型中图分类号：R373.9文献标识码：A文章编号：1000-8721（2005）04-0269-05近年我国宫颈癌（CerVicalcancer）病人数目在发现和早期诊断具有重要价值。逐渐上升并呈年轻化的趋势。对宫颈癌的病因学研究可知，人乳头瘤病毒（HumanpapillomaV

4、irus，材料与方法HPV）是宫颈癌发生的重要因素。因此研究宫颈癌高发区江西省妇女目前生殖道HPV的感染现状，1研究对象宫颈脱落细胞取自江西省妇幼保健院和中山大学第五附属医院。江西省宫颈脱落细胞标本分类情况：宫探索宫颈癌患者感染的主要HPV型别及其主要影颈癌643例，宫颈上皮内瘤样病变（CIN）92例，慢性宫颈炎响因素，为未来HPV疫苗的研制开发提供依据，是31例，尖锐湿疣4例，卵巢癌2例，外阴阴道癌7例，子宫内宫颈癌防治工作的当务之急。目前世界上已发现的膜癌21例，合计800例。江西省另外2460例妇女参加了宫HPV有100

5、余种，共有27种可从宫颈癌组织中发颈癌筛查。广东省宫颈脱落细胞标本分类情况：宫颈癌10现［1］。在宫颈上皮内高度病变（CIN2／3）和宫颈癌例，CIN5例，慢性宫颈炎675例，正常宫颈组织均为随机取组织中，90%以上亚型为HPV16、18、31、33、35、自同期手术经镜检证实无宫颈病变者，1080例，合计177039、45、51、56、58、59和68型［2］。研究资料表明，例。宫颈癌外周血50例，石蜡包埋宫颈癌组织45例。［3，4］。LeVi等［5］2标本采集2000年1月至2005年1月，研究对象用采样99.7%宫颈癌患

6、者存在HPV感染刷收集标本，收集宫颈脱落细胞。采样刷放在样品输送介质还发现，高达64.3%的宫颈癌患者同时感染有高危（STM）液体里室温保存，应用第二代杂交捕获法（HC2）检测型和低危型HPV，增加了宫颈癌的治疗难度。本研高危型HPV的DNA。同时取宫颈脱落细胞放于生理盐水究采用GPPCR-SBT（GeneralprimerPCRseCuence-中，置-20C保存，应用GPPCR-SBT方法对HPV进行基因basedtyping）和第二代杂交捕获法（1ybridcapture分型。2，HC2）分析宫颈癌和癌前病变患者高危型H

7、PV3HPVDNA分析采用HC2（美国Digene公司）检测HPV感染状况，为临床防治宫颈癌提供科学依据。同时DNA，它是一种高效的核酸杂交微量反应检测法，应用信号将HPV基因分型研究用于分子流行病学和高危型扩大技术捕获HPVDNA并产生化学荧光。混合探针可以检测到13种高危型别HPV，包括16、18、31、33、35、39、45、致癌HPV感染妇女的追踪观察，对宫颈癌的早期51、52、56、58、59和68型。标本HPV-DNA!1.0pg／ml判为收稿日期：2004-11-4；修回日期：2005-02-26阳性。基金项目：

8、国家自然科学基金项目（30160090）资助4HPV基因分型模板DNA制备采用酚-氯仿-异戊醇法。第一作者简介：吴玉萍（1963-）：女，博士，副教授，主要研究遗传学。宫颈脱落细胞收集后用PBS洗涤，取沉淀细胞提取DNA。通讯作者：吴玉萍，E-mail：exwyp!163.c