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时间:2017-12-10
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1、发酵液的固液分离固液分离的目的收集胞内产物的细胞或菌体,分离除去液相收集含生化物质的液相,分离除去固体悬浮物(细胞、菌体、细胞碎片、蛋白质的沉淀物和它们的絮凝体等)。影响发酵液固液分离的因素1)发酵液中悬浮离子的大小2)发酵液的黏度viscosity:固液分离速度通常与粘度成反比,粘度越大,固液分离越困难。影响粘度的因素:菌体的种类和浓度(重要因素),通常丝状菌、动物或植物细胞悬浮液粘度较大,浓度增大,粘度也提高。培养液中蛋白质、核酸大量存在:通常细胞破碎或细胞自溶后粘度增大。因此细胞破碎的程度应控制,发酵放罐时间要适宜。培养基成分:如用黄豆粉、花生粉作氮源,淀粉作碳源,粘度都会升高。
2、此外,某些染菌发酵液,如染细菌,则粘度会增大。发酵过程的不正常处理,如大量过剩的培养基和消沫油加入,都会使粘度增大。常见的固液分离方法(一)过滤常规过滤错流过滤(二)离心分离(三)发酵液不经固液分离直接提取分离过滤filtration过滤操作是借助于过滤介质,在一定的压力差ΔP作用下,使悬浮液中的液体通过介质的孔道,而固体颗粒被截留在介质上,从而实现固液分离的单元操作。过滤介质filtermedium:过滤采用的多孔物质;滤浆filterpulp:所处理的悬浮液;滤液filtrate:通过多孔通道的液体;滤饼或滤渣filtercake:被截留的固体物质。滤饼过滤:当悬浮液通过滤布时,固
3、体颗粒被滤布阻拦而逐渐形成滤饼(滤渣)。在滤饼过滤中,当滤饼至一定厚度时即起主要的过滤作用适合于固体含量大于0.1%的悬浮液的过滤分离。过滤推动力:悬浮液自身压强差、重力悬浮液的—外加压力过滤介质的—抽真空离心力过滤阻力:介质阻力:可视为平变,且一般过滤初较明显滤饼阻力:滤饼厚度:随过滤进行而增加滤饼特性:颗粒形状、大小。大多情况下,过滤阻力主要取决于滤饼阻力。过滤速度的强化1.降低滤饼比阻力rB一切能够降低rB的方法:如添加电解质、絮凝剂、凝固剂助滤剂等。2.降低滤液黏度μ黏度愈低,过滤阻力愈小。加热、去杂蛋白、絮凝、调PH、选择合适的放罐时间。3.降低悬浮液中悬浮固体的浓度过滤速度
4、与获得滤饼体积成反比。因此应尽可能降低培养基配料浓度(如玉米粉、豆饼粉的浓度)。4.对发酵液进行预处理,改善滤液性质。过滤介质选择过滤介质起过滤作用,还是滤饼的支撑物。应具有足够的机械强度和尽可能小的流动阻力。合理选择过滤介质:过滤介质所能截留的固体粒子大小:通常以过滤介质的孔径表示。常用的过滤介质中,纤维滤布所能截留的最小粒子约10μm,硅藻土为lμm,超滤膜可小于0.5μm。过滤介质的透过性:是指在一定的压力差下,单位时间单位过滤面积上通过滤液的体积量,它取决于过滤介质上毛细孔径的大小及数目。过滤介质-织物介质又称滤布,应用最广泛,包括由棉、麻等天然纤维滤布和合成纤维滤布。其过滤性
5、能受许多因素的影响,其中最重要的是纤维的特性、编织纹法和线型。过滤介质-粒状介质有硅藻土、珍珠岩粉、细砂、活性炭、白土等。最常用的是硅藻土,是优良的过滤介质:①一般不与酸碱反应,化学性能稳定;②形状不规则,空隙大且多孔,具有很大的吸附表面;③无毒且不可压缩,形成的过滤层阻力不随操作压力变化。硅藻土过滤介质通常有三种用法:(1)作为深层过滤介质。硅藻土过滤层具有曲折的毛细孔道,借筛分、吸附和深层效应作用除去悬浮液中的固体粒子,截留效果可达到1μm。(2)作为预涂层。在支持介质的表面上预先形成一层较薄的硅藻土预涂层,用以保护支持介质的毛细孔道不被滤饼层中的固体粒子堵塞。(3)用作助滤剂。过
6、滤介质-多孔固体介质如多孔陶瓷、多孔玻璃、多孔塑料等,可加工成板状或管状,孔隙很小且耐腐蚀,常用于过滤含有少量微粒的悬浮液。典型过滤设备:按操作方式分类:间歇过滤机、连续过滤机按操作压强差分类:压滤、吸滤和离心过滤实验室用抽滤装置板框压滤机(间歇操作)转筒真空过滤机(连续操作)过滤式离心机固液分离过滤设备151)实验室用抽滤装置2)板框压滤机plateandframefilter板框压滤机的过滤推动力来自泵产生的液压或进料贮槽中的气压。广泛应用于培养基制备的过滤及霉菌、放线菌、酵母菌和细菌等多种发酵液的固液分离。适合于固体含量1-10%的悬浮液的分离。17板框压滤机包括板和框,多做成正
7、方形,角端均开有小孔,装合压紧后即构成供滤浆或洗水流通的孔道。框的两侧覆以滤布,空框与滤布围成了容纳滤浆及滤饼的空间,滤板用以支撑滤布并提供滤液流出的通道。板框压滤机优点过滤面积大,结构简单,价格低,动力消耗少,对不同过滤特性的发酵液适应性强。它最重要的特征是通过过滤介质时产生的压力降可以超过0.1MPa,这是真空过滤器无法达到的。缺点不能连续操作,设备笨重,劳动强度大,卫生条件差,非过滤的辅助时间较长。自动板框式压滤机自动板框压滤机在板框压紧
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