棕尾别麻蝇金属硫蛋白的分离纯化及性质分析.pdf

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1、昆虫学报ActaEntomologicaSinica，February2006，49（l）：22-28ISSN0454-6296"""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""棕尾别麻蝇金属硫蛋白的分离纯化及性质分析吴国星，李凯，叶恭银!，胡萃，程家安（浙江大学应用昆虫学研究所，杭州3l0029）摘要：将棕尾别麻蝇Boettcheriscaperegrina幼虫置于含800的食物中取食48h后，可诱导金属硫蛋白（MT）!g/gCdCl2的合成。诱导处理后的幼虫匀浆上清液经SephadexG-50分子筛柱、UN

2、OTM@l阴离子交换柱和Bio-GelP-6脱盐柱层析，纯化得到2个亚型，即MT-"和MT-#。MT-"和MT-#的分子量均为9kD，每蛋白分子均含7个Cd和20个巯基，且具254nm的Cd-SH特征吸收肩。两者的氨基酸组成中，以半胱氨酸含量最高，分别为36.6和3l.8；而芳香族氨基酸和组氨酸含量甚少，约l2。关键词：棕尾别麻蝇；金属硫蛋白；分离纯化；性质分析；氨基酸组成中图分类号：@966文献标识码：A文章编号：0454-6296（2006）0l-0022-07Isolation，purificationandcharacterizationofmetallothioeinfromBoet

3、tcheriscaperegrina（Diptera：Sarcophagidae）!，HUCui，CHENGJia-An（InstituteofAppliedEntomology，ZhejiangWUGuo-xing，LIKai，YEGong-YinUniversity，Hangzhou3l0029，China）Abstract：Themetallothioneins（MT）inBoettcheriscaperegrinalarvaewereinducedandproducedaftertheirfeedingonthedietarycontaining800!gcadmiumchloride

4、spergramdietfor48hours.TwoformsofMTs（MT-"andMT-#）wereisolatedandpurifiedfromthesupernatantofthewholebodyhomogenatesfromthelarvaeafterexposuretocadmiumchlorides，usinggelchromatographyonSephadexG-50，ion-exchangeTMchromatographyonUNO@l，anddesalinationonBio-GelP-6.MolecularweightforbothMT-"andMT-#was9kD

5、.BothMT-"andMT-#contained7cadmiumatomsand20sulfhydrylgroupspermolecule，andshowedthespectralcharacteristicofcadmium-thionein，i.e.abroadshoulderat254nm.Astoaminoacidcomposition，thecontentofcysteineresidueswasthehighest，accountingfor36.6and3l.8ofallaminoacidsforMT-"andMT-#respectively；however，theconten

6、tsofaromaticaminoacidandhistidinewereverylow，justsharingl-2ofallaminoacids.Keywords：Boettcheriscaperegrine；metallothionein；isolationandpurification；characterizationanalysis；aminoacidcomposition金属硫蛋白（metallothionein，MT）是一类低分子明金属硫蛋白或金属结合蛋白存在多种昆虫中，如量的富含半胱氨酸且可被重金属、激素和各种细胞摇蚊Chironomusyoshimatsui（Yamamura

7、etal.，因子诱导的金属结合蛋白。其功能包括微量元素储l983）、石蝇Eustheniaspectabilis（EverardandSwain，存、运输、代谢，重金属解毒，拮抗电离辐射，清除羟l983）、棕尾别麻蝇Boettcherisca（Sarcophaga）基自由基等。自Margoshes和Valle（el957）首次从马peregrina（Aokietal.，l984）、德国小蠊Blat