溴氰菊酯诱导果蝇细胞毒性及相关基因表达的变化-论文.pdf

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1、第37卷第2期南京师大学报(自然科学版)Vo1．37No．22014年6月JOURNALOFNANJINGNORMALUNIVERSITY(NaturalScienceEdition)June，2014溴氰菊酯诱导果蝇细胞毒性及相关基因表达的变化焦东旭，李娜，程晨，葛春男，程罗根(南京师范大学生命科学学院，江苏南京210023)[摘要]溴氰菊酯(deltamethrin，DM)是一种神经毒剂，由于其高效、低毒而被广泛用于农业害虫的防治．长期大范围不合理的使用导致害虫产生抗药性，但目前其确切的抗药性作用机制仍不十分清楚．本研究对溴氰菊酯细胞毒

2、性的研究显示DM染毒可以使果蝇Kc细胞增殖、细胞形态和细胞活性发生明显变化．较低和较高浓度的DM能明显抑制细胞活性，在15ppm诱导下果蝇细胞的活性有一定程度的升高．实时荧光定量PCR和免疫印迹分析结果显示，经DM处理后的果蝇Kc细胞中与氧化应激反应和免疫相关的基因的表达量显著上调．本研究对细胞毒性和基因表达差异的检测，为进一步探讨与溴氰菊酯抗药性相关的细胞和分子毒理提供了研究基础．[关键词]溴氰菊酯，细胞毒性，实时荧光定量PCR，免疫印迹分析[中图分类号]$481+4[文献标志码]A[文章编号]1001—4616(2014)02—0106

3、—06InductionoftheCytotoxicityandtheRelativeGenesExpressionResponseofDeltamethrininDrosophilaKccellsJiaoDongxu，LiNa，ChengChen，GeChunnan，ChengLuogen(SchoolofLifeSciences，NanjingNormalUniversity，Nanjing210023，China)Abstract：Dehamethrin(DM)isakindofnerveagent，andcommonlyusedin

4、controllingcroppests，becauseofthehigheficacy，lowtoxicity．WidespreadandimproperuseofDMinducedinsectresistance，buttheresistancemechanismisnotclearatpresent．Cytotoxicityanalysisrevealsthatthecellsproliferation，cellularmorphologyandcellsviabilityhavesignificantchangesunderDMst

5、ress．TooLowortoohighconcentrationofDMcouldobviouslyinhibittheactivityofcells．Under15ppmtreatment，cellactivitywashigher．Real—timequantitativePCRandwestern-blottinganalysisdemonstratedthatthegenesassociatedwithoxidativestressandimmuneresponseswereinducedsharplyunderDMstress。

6、OurresearchfocusesOntheeytotoxicityandgenedifferentialexpression，theseresultscanprovidebasisforthestudyofmoleculartoxicologyandmechanismofdeltamethrinresistance．Keywords：deltamethrin，cytotoxicity，real-timequantitativePCR，westernblotting溴氰菊酯是杀虫活性高、击倒速度快、杀虫谱广、对人畜低毒的一类杀虫剂，因此在

7、防治卫生害虫和农作物害虫中占有重要地位⋯．长期大量不合理使用杀虫剂会导致害虫抗药性的产生与发展，代谢抗性是重要的抗性机制．昆虫的代谢抗性主要是昆虫在杀虫剂的选择压力下，诱导体内解毒酶基因的扩增和过表达，使得代谢酶的活性显著提高，加速体内杀虫剂的代谢使其变成低毒或无毒物质，由此产生对杀虫剂的抗性_2J．昆虫体内代谢解毒酶主要有以下三类：谷胱甘肽s一转移酶，P450单加氧酶，酯酶J．溴氰菊酯的代谢是多种基因，多种信号通路协同相互作用来实现的．近年来有关杀虫化合物诱导的昆虫细胞毒性作用的文献报道渐多，其中杀虫剂对昆虫细胞凋亡诱导作用引起的细胞形态

8、和细胞活性是关注的重点，戴璇颖等采用荧光染色、单细胞凝胶电泳、流式细胞仪等技术研究认为，莠去津浓度处理家蚕卵巢培养细胞后24h可诱导产生明显的细胞凋亡等一系列细胞形态的变化，且有