不同剂量CpG-ODN佐剂与ALV-Jgp85重组蛋白联合免疫诱导种母鸡血清抗体和母源抗体的比较-论文.pdf

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1、孙徽髓黼瓣Onlines⋯装ystem：http：／／www．jabiotech．orggy陆娑蠡不同剂量CpG．ODN佐剂与ALV-Jgp85重组蛋白联合免疫诱导种母鸡血清抗体和母源抗体的比较聂杰张丹丹’井维芳任庆亚崔治中郭慧君”李宏梅”山东农业大学动物科技学院，山东省生物工程与疫病防治重点实验室，泰安271018同等贡献作者通讯作者，hjguo@sdau．edu．cn；lihm@sdan．edu．cn摘要为比较不同剂量非甲基化寡聚脱氧核苷酸(CpG—ODN)免疫佐剂与J亚群禽白血病病毒(SubgroupJAvi

2、nnleukosisvirus，ALV-J)gp85重组蛋白联合免疫后诱导母鸡血清抗体和母源抗体的效果，利用原核表达系统制备包含gp85基因的重组蛋白作为免疫原，与不同剂量CpG免疫佐剂联合接种成年海兰褐父母代种母鸡(Callusdomesticus)，首免后2周加强免疫一次，于接种前和接种后每周动态检测血清抗体，接种后部分鸡只每周收集种蛋，检测卵黄抗体。结果显示，利用原核表达系统制备的gp85重组蛋白能与ALV-J单克隆抗体JE9特异性结合；与3个不同剂量CpG联合免疫成年种母鸡后均诱导鸡只产生一定效价的血清抗体

3、，首免后28d效价最高；所诱导的卵黄抗体效价首免后第4周最高。其中以50羽剂量的CpG联合重组蛋白接种鸡只诱导的血清抗体和卵黄抗体效价和阳性比例最佳，100pg／羽剂量的CpG次之。3个不同剂量的CpG与ALv_Jgp85重组蛋白联合免疫均能诱导母鸡产生一定的血清抗体和卵黄抗体，50g／羽剂量的CpG联合免疫的效果明显优于较高剂量的免疫效果。本研究为使用CpG联合ALv-Jgp85重组蛋白诱导母鸡产生母源抗体，阻断ALV-J早期感染提供科学依据。关键词非甲基化寡聚脱氧核苷酸(CpG—ODN)佐剂，J亚群禽白血病病毒

4、(ALV-J)gp85重组蛋白，种母鸡，剂量，母源抗体，血清抗体ComparisonofSerumandEggYolkAntibodiesInducedbyDifferentDosesofCpG—ODNAdjuvantCombinedwithALV-Jgp85RecombinantProteinsinBreedingHens(Gallusdomesticus)NIEJieZHANGDan．DanJINGWei-FangRENQing-aCUIZhi—ZhongGUOHui-Jun”LIHong．Mei”Colleg

5、eofAnimalScienceandVeterinaryMedicine，ShandongAgriculturalUniversity,KeyLaboratoryofAnimalBiotechnologyandDiseaseControlandPrevention，Tai’an271018，ChinaTheauthorswhocontributeequallyCorrspondingauthors．hjguo@sdau．edu．cn；lihrn@sdau．edu．CflAbstractTocomparetheef

6、ectsofthreedifferentdosesofCpGoligonucleotide(CpG—ODN)adjuvantscombinedwithsubgroupJAvianleukosisvirus(AIⅣ-J)gp85recombinantproteinonserulTlandeggyolkantibodiesinbreedinghens(Gallusdomesticus)，therecombinantproteincontainingALV-J印85genewaspreparedusingtheproka

7、ryoticexpressionsystemandvaccinatedcombiningwiththreediferentdosesofCpG—ODNadjuvantintoadultHy—lineBrownparentbreedinghens，theboosterimmunizationwasconductedwithtwoweeksinterva1．TheserumantibodiesandtheeggyolkantibodiesagainstALV-Jweredetectedweekly基金项目：公益性行业(

8、农业)科研专项经费资助(No．201203055)收稿日期：2013．09．09接受日期：2013．10—18220。gyusingALV_Jantibodykitsfrom1daypostinoculationto49daypostinoculationandthedatawerestatisticallyanalyzedwithANOVAsoftware