不同包埋基质对青天葵人工种子萌发率的影响-论文.pdf

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1、2013年11月第30卷第6期广州中医药大学学报November2013．V01．30．No．6JournalofGuangzhouUniversityofTraditionalChineseMedicine901·南药园地·不同包埋基质对青天葵人工种子萌发率的影响杜勤，龚雪梅，程凤丽(广州中医药大学，广东广州510405)摘要：【目的】以青天葵根状茎诱导的再生球茎作为种胚，考察不同包埋基质对青天葵人工种子萌发率的影响。【方法】采用6因素2水平的正交实验设计考察不同包埋基质：50．0g／L海藻酸钠、1．0nag／L6-糠氨基嘌呤(KT)、0．5mg／X青

2、霉素、0．3mg／L赤霉素(GA3)、O．5一萘乙酸(NAA)、2．0mg／L6-苄基嘌呤(6-BA)对人工种子萌发率及生长的影响。【结果】50．0g／L海藻酸钠+o．3mg／'LGA。+1．0rng／LKT+o．5mg／L青霉素的包埋基质组合对青天葵人工种子的萌发率达到85％以上，并且萌发比较整齐，萌发后长势良好。【结论】建立了青天葵人工种子的制作方法，获得了较高的萌发率。关键词：青天葵／生长与发育；人工种子：包埋基质：萌发率中图分类号：R282．2文献标志码：A文章编号：1007—3213(2013)06—0901—04青天葵来源于兰科多年生宿根草本

3、植物毛唇芋备用。兰Nerviliafordii(Hance)Schltr．，以叶或带块茎1．2试剂与仪器海藻酸钠(天津市福晨化学试的叶入药，是广东道地药材。主产广东、广西、海剂厂)；6一糠氨基嘌呤(KT．上海丽珠东风生物技南，在两广、港澳及东南亚等地较常用．出口量较术有限公司)：青霉素(上海源聚生物科技有限公大．价格昂贵．但货源紧张，远远不能满足市场需司)；一萘乙酸(NAA，上海伯奥生物科技有限公求[由于青天葵种子无胚乳。仅靠无性繁殖．每司)；6一苄基嘌呤(6-BA，上海伯奥生物科技有限株每年只繁殖1～2个球茎．每个球茎上只长一片公司)；赤霉素(GA。，

4、广州科因生物科技有限公叶子．繁殖系数极低：另一方面青天葵仅适宜于石司)；无水CaC1(天津市百世化工有限公司)：蔗灰岩地区有荫蔽、潮湿的环境．其资源分布极其有糖(广州化学试剂厂)；琼脂粉(广东环凯微生物z]：多年来，乱采乱挖导致野生青天葵资源日益科技有限公司)；其他试剂皆为分析级；DL—CJ一1F枯竭：人工栽培由于种源无法解决，而不能大面积型单人双面超净工作台(中国哈尔滨东联电子技术人工种植．急需人工方法促使其快速繁殖增加药材有限公司)：JJ300型电子天平(日本Electronic产量[。sca1e公司)：VXQ—LS一30SLL立式压力蒸气灭菌器人工

5、种子技术的诞生为珍稀紧缺药材的产业化(上海申安医疗器械厂)生产提供了一条有效途径。人工种子不受季节的限制。不需要大量的栽植地和种子．且便于运输．可2方法与结果减少病原菌的传播．还可保持原品种优良的种性[。2．1正交试验的设计选用6因素2水平的正交本研究以青天葵组织培养诱导形成的再生球茎作为实验考察不同包埋基质：海藻酸钠(L)、KT种胚．考察以海藻酸钠为人工种皮．添加不同营养(mg／L)、青霉素(mg／L)、GA，(mg／L)、NAA成分．比较不同因素对青天葵人工种子萌发率的影(mg／L)、6-BA(mg／L)对青天葵人工种子萌发率响．研制青天葵人工种子，

6、现报道如下及生长的影响(因素水平安排见表1)2．2人工种子的制作从青天葵组织培养物中摘l材料取再生球茎，用MS液配制2．0g／L活性炭、3．01．1材料试验所选的材料为青天葵组织培养的g／L多菌灵及2．0g／L苯甲酸钠的}昆合溶液作为基再生球茎，其中大球茎直径大于10．0mm，小球茎本包埋物质。采用滴注法_5_，将摘取的球茎浸人海直径在6．0～8．0mm．用蒸馏水洗净表面残留培养基藻酸钠混合溶液中．添加生长调节物，10min后收稿日期：2013—04—10作者简介：杜勤(1969一)，女，教授，中药学博士；E—mail：duqingz@qq．con／基金

7、项目：广东省自然科学基金项目(编号：500429)广州中医药大学学报2013年第3O卷表1L。(2e)因素水平表在铺有2层干滤纸的培养皿中，然后转接入MS培Table1Levelsandfactorsfor(2。)design养基中．每瓶培养基中接人5粒，均匀分开排放，2345678R做好记录及标志．全部转接完后将培养基放于光照培养架上培养．光照条件2500Lx，温度25℃。每天早上9点观察记录萌发情况．以人工种子突破种皮0．5cm以上为标准记为发芽，30d后观察并统56l。2222计人工种子的萌发率：萌发率=萌发的人工种子550数／供试种子总数X100

8、％2．4统计方法实验数据用SPSS19．0软件处理注：“+”表示添加；“一”表示