埃博拉病毒包膜蛋白DNA表达质粒对小鼠中和抗体的诱导作用-论文.pdf

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1、866中国生物制品学杂志2013年6月第26卷第6期ChinJBiologicalsJune2013，Vo126No．6·技术方法埃博拉病毒包膜蛋白DNA表达质粒对小鼠中和抗体的诱导作用何丽芳-，武雯俊，王丽丽’，陈敏，王馨，杨宁，黄镇1．云南沃森生物技术股份有限公司，云南昆明650106；2．北京协和医学院基础医学研究所，北京100005摘要：目的探讨埃博拉病毒(Ebolavirus)包膜蛋白GPDNA表达质粒对小鼠中和抗体的诱导作用。方法将质粒pcDNA3．1、pcDNA3．1cP(全长GP)、pcDNA3．1-GPATM(去跨膜段

2、的GP)和pcDNA3．1一GPAMet(去起始密码子的()分别经肌肉注射免疫BAIB／c小鼠，ELISA法检测血清GP抗体滴度；Westernblot法检测抗体的特异性；利用埃博拉假病毒感染293E细胞模型观察中和抗体对埃博拉假病毒的中和作用。结果全长的埃博拉病毒GP和去跨膜段的GP可诱导有效的免疫反应，且诱导生成的GP抗体特异性良好；GP抗血清可有效抑制埃博拉假病毒进入293E细胞。结论埃博拉病毒GPDNA表达质粒可诱导高滴度的中和抗体，并可有效中和埃博拉假病毒。关键词：埃博拉病毒；包膜蛋白；中和抗体中图分类号：R373．9R392

3、—33文献标识码：A文章编号：1004—5503(2013)06—0866—03InductionofneutralizingantibodyinmicebyplasmidDNAencodingenvelopeglycoproteinofEbolavirusHELi—fang。，WUWen—jun，WANGLi—li，CHENMin，WANGXin，YANGNing，HUANGZhenYMnnr上Wal(1XBi0techno10gYC0．Ltd．，Kunming650106．YunnanProvice，Chin0Correspondi

4、ngauthor：HUANGZhen．E—mail：wa!vaxhuangzhen@126．COltAbstract：ObjectiveToinvestigatetheinductionofneutralizingantibodyinmicebyplasmidDNAencodingenvelopeglycoprotein(GP)ofEbolavirus．MethodsBALB／Cmicewereinjectedi．m．withplasmidspcDNA3．1．pcDNA3．1一GP(fulllengthGP)，pcDNA3．1一GPAT

5、M(GPwithtransmembranedomaindeleted)andpcDNA3．1。GPAMet(GPwithoriginalcodondeleted)respectively，anddeternlinedforserumantibodytiteragainstGPbyE1ISA．)rspeciticityofan—tibodybyWesternblot，andtbrneutralizingefficiencybyEbolapseudovirusmockinfectionin293Ecells．ResultsBothfull—

6、lengthGPandtheGPwithtransmembranedomaindeletedinducedeffectiveimmuneresponse，andtheinducedGPantibodyshowedhighspecificity．GPantiseruminhibitedtheentryofEbolapseudovimsinto293Ecells．ConclusionPlasmidDNAencodingGPofEbolavirusinducedhightiterneutralizingantibodywhichneutral

7、izedEbolapseudovirusef-fectively．Keywords：Ebolavirus；Envelopeglyeoprotein；Neutralizingantibody埃博拉病毒(Ebolavirus)为负链RNA包膜病抗体对埃博拉假病毒的中和作用。毒，对人类具有50％～90％的致死率。由于其致死率高，且目前尚无被证实有效的疫苗，被列为生物1材料与方法安全第四级病毒]。最近，乌干达暴发的埃博拉病毒感染已致超过16人死亡[4j。1．1质粒及细胞质粒pcDNA3．1、pcDNA3．1GP中和抗体治疗是针对病毒感染诱导的疾

8、病的一(全长GP)、pcDNA3．1一GPATM(去跨膜段的GP)和个极具潜力的治疗领域，已在针对逆转录病毒疾病pcDNA3．1一GPAMet(去起始密码子的GP)均由云南的治疗中显示良好的效果l5f。埃博