纳米银离子对铜绿假单胞菌生物被膜结构的影响的分析-论文.pdf

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1、中国微生态学杂志2014年6月第26卷第6期ChineseJournalofMicroecology，Jun．2014，Vo1．26No．6641·论著·纳米银离子对铜绿假单胞菌生物被膜结构的影响的分析邹志慧，余加林，杨冰岩，吕峻峰，王维琼，陈少渡1．广东省中山市博爱医院新生儿科，广东中山528400；2．重庆医科大学附属儿童医院新生儿科，重庆400014摘要：目的探讨纳米银离子对细菌生物被膜(biofilm，BF)的空间结构的影响。方法采用摇床法，以纳米银离子含量不同的乙烯一醋酸乙烯酯(Ethylene—Vinylacetate，EVA)塑料为细菌粘附载体，模拟体内铜绿假单胞菌

2、(Paeruginosa，PA)BF形成的微环境，建立体外BF模型；将培养3d的空白标本分别在扫捕电子显微镜(scanningelectronmicroscopy，SEM)下及用FITC—ConA染色后荧光显微镜下观察不含纳米银EVA巾BF的形成情况；将生长0．5、1、2、3、5d的BF模型行SYTO9／PI染色，激光共聚焦扫描电镜(confo—callaserscanningmicroscopy，CLSM)下摄取不同层面的图像，然后应用激光共聚焦显微镜TCSSP2自身具有的分析软件及ISA分析软件获得PAO1菌株BF的相关空间结构参数定量化数据。结果(1)运用SEM及荧光显微镜

3、的方法，在以不含纳米银EVA塑料为细菌粘附载体上培养3d的标本中均观察到流线状的BF形成。(2)激光共聚焦显微镜TCSSP2自身具有的分析软件定量化分析显示，随着时间的延长，各含纳米银离子材料组PAO1菌株BF的平均厚度都呈先升高后降低的趋势，3天组都达最高值；纳米银离子的含量对BF厚度的影响差异无统计学意义(F=2．11，P>0．1)，作用时间对BF厚度的影响差异有统计学意义(F=985．81，P<0．001)。(3)ISA软件定量化分析显示，银离子含量、作用时间对BF空间结构均有明显影响，不同时间组含有纳米银离子材料上BF的区域孔率(ArealPorosity，AP)、平均扩

4、散距离(Aver—ageDiffusionDistance，ADD)及结构熵(TexturalEntropy，TE)影响的均显著高于空白对照组(P<0．05)，但2种纳米银离子材料上BF的AP、ADD及TE的影响差异无统计学意义(P>0．05)。随着培养时间的延长，各含纳米银离子材料组PAO1菌株BF的AP值、ADD值无明显的变化趋势，同一时间组的含有纳米银离=材料组PAO1菌株BF的AP值都高于空白对照组的AP值；同一时间组的含有纳米银离子材料组PAO1菌株BF的ADD值都低于空白对照组的ADD值。各含纳米银离子材料组PAO1菌株BF的TE值随着时问的延长，都呈先升高后降低的趋

5、势，2天组都为最高值；同一时间组的TE值随着含纳米银离子的增加都呈降低趋势。结论运用摇床法成功建立了体外PA01菌株BF模型；纳米银离子对PAO1菌株BF空间结构有显著的影响。关键词：细菌生物膜；模型；纳米银离子；定量分析中图分类号：R378．991文献标志码：A文章编号：1005—376X(2014)06-064l-05DOI编码：10．13381／j．cnki．cjm．201406005Efectofsilvernanoparticleonthespatialstructure0fPseudomonasaeruginosabiofilmsZOUZhi—hui，YUJia—li

6、n，YANGBing—yan，LYUJun—feng。WANGWei—qiong，CHENShao—bo1．NeonatalDepartment，B0’aiHospital，Zhongshan528400，China；2．NeonatalDepartment，theChildren'sHospitalAffiliatedtoChongqingMedicalUniversity，Chongqing400014，ChinaCorrespondingauthor：YUJia—lin，Email：alin486@sohu．com基金项目：中山市科技计划项目(20122A060)作22：毒

7、(977_)，男，主治医生，研究方向：新生儿感染方向，EmaiJ：292451854@qq．。堰讯作者：余加林，Email：yujialin486@sohu．com～中国微生态学杂志2014年6月第26卷第6期ChineseJournalofMicroecology，Jun．2014，Vo1．26No．6Abstract：0bjectiveToanalyzetheeffectofsilvernanoparticleonthespatialstructureofPseudomona