鸡马立克氏病病毒疫苗株对强毒株的复制抑制作用-论文.pdf

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1、第36卷第1期中国预防兽医学报Vo1．36．No．12014年1月ChineseJournalofPreventiveVeterinaryMedicineJan．2014doi：10．3969~．issn．1008-0589．2014．01．02鸡马立克氏病病毒疫苗株对强毒株的复制抑制作用郑永胜，张艳萍，李志杰，郑惠文，谭成章，刘长军(中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室／禽传染病研究室，黑龙江哈尔滨150001)摘要：为研究鸡马立克氏病(MD)疫苗株对强毒株体内复制的抑制作用，本研究依据鸡MD病毒(MDV)R-LORF2基因序列设计引物和探针，建立特异性定量检

2、测MDV流行强毒株L．CY的荧光定量PCR方法，并且应用该方法对CVI988疫苗株免疫后不同时间间隔L．CY株攻毒鸡体内不同组织的强毒载量进行动态的定量检测。结果显示，免疫后7d和14d攻毒鸡体内不同组织强毒栽量显著低于单独攻毒鸡；而同时免疫和攻毒组鸡中强毒载量无明显降低。在免疫后7d攻毒组中，法氏囊中的强毒载量始终稳定在低水平，但羽髓和肾脏中的强毒载量自攻毒后21d开始明显上升。结果表明，至少要在感染L．CY株14d前免疫，CVI988疫苗株才能有效抑制强毒株在体内的复制。此外，当免疫后7d攻毒时，在羽髓或肾脏等非免疫器官中，疫苗病毒不能持续抑制强毒复制，最终导致疫苗不能提供有效

3、的保护。本研究为MD免疫机制的进一步研究提供了依据。关键词：马立克氏病病毒；病毒载量；荧光定量PCR；抑制作用中图分类号：$852．65文献标识码：A文章编号：1008—0589(2014)01．0007．04InhibitionofMarek’sdiseasevaccinevirusonreplicationofthevirulentvirusstrainZHENGYong-sheng，ZHANGYan—ping，LIZhi-jie，ZHENGHui—wen，TANCheng-zhang，LIUChangdun(DivisionofAvianInfectiousDiseases，

4、StateKeyLaboratoryofVeterinaryBiotechnology，HarbinVeterinaryResearchInstitute，ChineseAcademyofAgriculturalSciences，Harbin150001，China)Abstract：TheinitialimmunomechanismofMarek’sdisease(MD)vaccineagainstMDisbasedoneficientlyinhibitingthereplicationofvirulentMDvirus(MDV)inchickenswhenexposuretot

5、hevirus．ToquantifytheinhibitiononvirulentMDVindiferenttissuesatdiferenttimepointsofexposurepostvaccination(pv)，theTaqManreal—timePCRwasestablishedwithapairofprimersandaprobedesignedaccordingtotheR-LORF2geneforspecificdetectionofvirulentMDV．Inaddition，theloadsofthevirulentviruswerequantifiedbyt

6、hereal—timePCRinchickenschallengedwithvirulentstrainofL—CYatdifferentdayintervalspvwiththevaccineCVI988．Theresultsshowedthatthevirulentvirusloadsweresignificantlylowerinchickenschallengedat7and14dayspv，comparedtothechallenged—onlygroup．However，thereplicationofthevirulentviruswasnotinhibitedund

7、ertheconditionofsimultaneousinoculationsofvirulentandvaccineviruses．Ⅵile，theloadofvirulentvirusinbursaofFabriciuswassteadilymaintainedatalowerlevelinthechickenschallengedat7or14dayspv．Whereas，thevirulentvirusinfeatherpulpandkidneywerere