鸭疫里默氏杆菌血清型鉴定及耐药性分析.pdf

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1、一168一江苏农业科学2014年第42卷第1期蔡丙严，王涛，吴植，等．鸭疫里默氏杆菌血清型鉴定及耐药性分析[J]．江苏农业科学，2014，42(1)：168—169鸭疫里默氏杆菌血清型鉴定及耐药性分析蔡丙严，王涛，吴植，李巨银(江苏农牧科技职业学院动物医学院，江苏泰州225300)摘要：从泰州地区疑似鸭疫里默氏杆菌感染鸭场采集病料，经细菌分离培养得到2株菌株，通过细菌形态、培养特性、生化试验等方法鉴定为鸭疫里默氏杆菌，分别命名为rY1株和TY2株。采用玻片凝集试验对2个分离株进行血清型鉴定、K—B纸片扩散法进行12种常用抗菌药物的药敏试验，结果显示，TY1和TY2株均为血清1型，对头孢吡肟、

2、环丙沙星高度敏感，对复方新诺明、阿米卡星、庆大霉素、青霉素、链霉素、阿奇霉素、林可霉素、利福平耐药。关键词：鸭疫里默氏杆菌；血清型；鉴定；药敏试验中图分类号：S858．322．61文献标志码：A文章编号：1002—1302(20l4)01—0168—02鸭疫里默氏杆菌(Riemerella肌口却￡r，RA)是一种革2107469)、胰蛋白酶大豆肉汤培养基(TSB，批号：2191068)，兰氏阴性、无鞭毛、无芽孢的棒状杆菌，瑞氏染色呈两极着色。均购自碧迪医疗器械(上海)有限公司；麦康凯琼脂培养基鸭疫里默氏杆菌所引起的传染病称为鸭传染性浆膜炎，该病(批号：12075)、普通琼脂培养基(批号：12

3、0909)，均购自杭州呈世界范围分布，给养鸭业带来了巨大的经济损失。天和微生物试剂有限公司。RA对营养要求较高，在普通营养琼脂和麦康凯琼脂上1．1．3药品阿莫西林、庆大霉素、环丙沙星、多西环素、头不生长，在胰酶大豆琼脂(TSA)、血液琼脂、巧克力琼脂上生孢吡肟、阿米卡星、复方新诺明、青霉素、链霉素、阿奇霉素、林长良好。RA在初次分离培养时对CO依赖性强，一般在烛可霉素、利福平等12种药敏试纸(批号：20120920)，购自杭罐或CO培养箱中，提高CO浓度和湿度，37℃培养48—州天和微生物试剂有限公司。72h，RA生长最佳。RA血清型众多且非常复杂，现在国1．1．4试剂革兰氏染液、瑞氏染液、

4、微量生化发酵管，均购际上报道的血清型共有21种，其中优势血清型为1型和2自杭州天和微生物试剂有限公司；犊牛血清，购自浙江天航生型，在我国，程安春等在此基础上又发现了4个新的血清物科技有限公司；鸭疫里默氏杆菌1—10型阳性血清，购自中型。血清型的复杂及血清型之间无交叉保护力给此病的国兽医药品监察所。防治带来极大的困难，多年来，由于生产上盲目用药、滥用药1．2方法或超剂量用药，RA对各种抗生素均产生不同程度的耐药性，1．2．1细菌分离培养与形态观察无菌采取病死鸭脑、心尤其对喹诺酮类和氨基糖苷类抗生素的耐药性非常普遍，耐血、肝脏等病料，分别接种于普通琼脂培养基、胰蛋白胨大豆药率极高，耐药情况复杂，

5、并且来自同一群不同株对同一药物琼脂培养基(TSA)、巧克力琼脂培养基、鲜血琼脂培养基和麦敏感性有差异的情况非常普遍。康凯琼脂培养基平板上，置37、5％CO：培养箱中培养从江苏泰州周边地区2个规模养鸭场临床疑似鸭疫里默48h。观察菌落形态，挑取单个疑似菌落涂片，革兰氏染色和氏杆菌感染的病死鸭中，进行病原分离和血清型鉴定，并且对瑞氏染色镜检，纯培养后，以40％甘油生理盐水于一7O℃保分离菌株进行药敏试验，为切实做好该病的防治工作提供存备用。依据。1．2．2生化试验挑取TSA琼脂培养基、鲜血琼脂培养基平板上纯化的疑似RA菌株，按EdwardsPR的方法用接种环1材料与方法在超净台将菌落接种于乳糖、

6、半乳糖、蕈糖、果糖、蔗糖、棉子1．1材料糖、葡萄糖、麦芽糖、甘露醇、山梨醇、枸橼酸盐、HS、M—R、1．1．1病料来源2013年3月，从泰州周边地区获得临床V—P尿素酶、吲哚等生化培养基上，继续培养48—72h观察具有典型鸭疫里默氏杆菌感染的病死鸭，从病死鸭的脑、心试验结果。血、肝脏中分离获得2株菌株，分别命名为rY1、TY2。1．2．3血清型鉴定将纯化培养的分离菌株在含有5％犊1．1．2培养基胰蛋白胨大豆琼脂培养基(TSA，批号：牛血清的TSA培养基上，37℃、5％CO：培养箱中培养36h。取1滴标准阳性血清滴于干净玻片上，挑取少量菌落混匀于标准阳性血清中，静置片刻观察玻片凝集结果。收稿1

7、3期：2013—05—091．2．4药敏试验采用K—B纸片扩散法，将保存的2株菌基金项目：江苏省高等学校大学生实践创新训练计划(编号：株分别在TSA琼脂培养基平板上扩增培养，刮取菌落，用灭012JSSP1TP3463)；江苏农牧科技职业学院科技资助项目(编号：菌生理盐水稀释细菌悬液至1．5X10个／mL，吸取0．1mL均YB1204)。作者简介：蔡丙严(1980一)，男，河南濮阳人，硕士，讲师，主要从事动匀涂