含环氧基固定化葡萄糖氧化酶共聚载体的催化性能研究

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1、现代食品科技ModernFoodScienceandTechnology2013,Vo1.29,No.12含环氧基固定化葡萄糖氧化酶共聚载体的催化性能研究李丕武,李瑞瑞,刘佃磊,郝琼,杨晴,王升(齐鲁工业大学食品与生物工程学院,山东济南250353)摘要:环氧基团可以在温和条件下与酶分子的氨基发生共价结合使其固定于载体表面。选用含有活性环氧基团的甲基丙烯酸缩水甘油酯(GMA)为单体,N'N一亚甲基双丙烯~-(MBAA)为交联剂,聚乙烯吡咯烷酮(evP)为稳定剂,2,2-偶氮二异丁腈(AmN)为引发

2、剂,乙醇水溶液为分散介质,并加入Fe04磁流体,通过反相悬浮聚合成功合成了大孔Fe=ofluid-GMA.MBAA共聚物载体(FGM)。通过调节磁流体和交联剂用量,可调节载体比表面积,孔径以及溶胀性能。将葡萄糖氧化酶(GoD)偶联于GMA含量20%,磁流体含量4%,交联剂含量40%的共聚物载体4FGM(40),制成固定化葡萄糖氧化酶,其表观酶活高达546.23~2.33U/g。讨论了固定化葡萄糖氧化酶的酶学}生质,在最适条件(55℃,pH8.0)下,固定化酶的表观酶活回收率为90.45%;连续使用

3、15次活性仍接近初始值的60%;固定化酶在4℃保存30d,活性保持不变。关键词:环氧基;反相悬浮聚合;固定化酶;葡萄糖氧化酶文章篇号:1673.9078(2013)12—2926.2930PropertiesoftheHydrophilicCopolymerSupporterContainingOxiranefIorI1mmobilizedGlueose0xidaseLIPi-wu,LIRui-rui,LIUDian-lei,HAOQiong,YANGQing,WANGSheng(Schoolof

4、FoodandBioengineering,QiluUniversityofTechnology,Jinan250353,China)Abstract:OxiranegroupscarlreactwiththeaminogroupsofenzymeundermildconditionsSOthatcouldbeimmobilizedonthesurfaceofcopolymersupporter.ThemacroporousFe~ofluid—GMA-MBAA(FGM)polymerweresyn

5、thesizedbymve~esuspensionpolymerizationwithglycidylmethacrylate(GMA)asthereactivemonomerandN,N'-methylene—bis—acrylamidefMBAA)asthecross—linkingagent.Polyvinylpyrrolidone(PVP)wasusedasthestabilizermonomerandazodiisobutyronitrile(AIBN)wasusedastheiniti

6、atormonomer.Fe304Wasaddedasmagnetofluidtothedispersionmedium,ethanolsolution.Theeffectsoftheamountofmagnetofluidandcrosslinkingagentonthestructurepropertiesandtheapparentactivityofimmobilizedenzymewereinvestigated.Therecoveryrateofapparentrelativeacti

7、vityof90.45%(about546.23~2.33Uwasobtainedwhentheglucoseoxidase(GOD)enzymewasimmobilizedonFGMpolymer[w(GMA)=20%,W(ferrofluid)=O.4%,w(MBAA)=40%]at55℃andpH8.0.Theenzymeactivitywasnearly60%ofitsinitialevenafterbeingusedfor15times.Aftera30一daystorageat4℃.t

8、heimmobilizedenzymeshowedlittlechangesinitsactivity.Keywords:oxirane;inversesuspensionpolymerization;imobilizedenzyme;glucoseoxidase葡萄糖氧化酶(GOD)是一种氧化还原酶,在高稳定性的固定化葡萄糖氧化酶(GOD)是本文的主要O2充足条件下,它能够快速专一地催化B—D一葡萄糖为内容。D—D.葡萄糖酸和H2O2【lJ,它广泛应用于食品、医药和一般采用吸附、

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