红背叶根不同提取物对小鼠急性免疫性肝损伤实验研究.pdf

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1、1082陕西中医2014年第35卷第8期·实验研究·红背叶根不同提取物对小鼠急性免疫性肝损伤实验研究杨静雯沈海容朱晓霞陈淳陈育尧刘强钟伟超赵晓华吕志平南方医科大学中医药学院(广州510515)摘要目的：探讨红背叶根4种不同提取物：原药水提物，石油醚提取物，乙酸乙酯提取物，正丁醇提取物对Con诱导的小鼠急性肝损伤的治疗作用，筛选其有效部位。方法：尾静脉注射Con一诱导小鼠急性免疫性肝损伤，以红背叶根4种不同提取物以高中低剂量组连续灌胃给药3d。检测小鼠血清谷丙转氨酶、谷草转氨酶、TNF⋯IFN及肝组织SOD、MDA含量；观察小鼠肝组织病理变化。结果：

2、红背叶根4种不同提取物可显著降低小鼠血清谷丙转氨酶、谷草转氨酶、TNF⋯IFN一及肝组织MDA含量，提高肝组织SOD活力，并可改善肝脏的组织形态。结论：红背叶根4种不同提取物对Con诱导的免疫性肝损伤具有显著的治疗作用。主题词@红背叶根不同提取物／药效学肝损伤急性免疫性小鼠实验研究【中图分类号】R575．1【文章标识码】Adoi：10．3969／j．issn．1000—7369．20l4．08．071红背叶根为为岭南药材，是双子叶植物药大戟科植物红背水溶液。阳性对照药甘利欣(江苏正大天晴药业股份有限公山麻杆(Alchorneatrewioides(

3、Benth．)Muel1．一Arg．)的根。司，批号：120411102)。昧甘，性平，功效清热解毒，祛风除湿，散瘀止血，平喘，杀虫止1．1．3试剂与仪器：主要试剂：Con—A(北京鼎国昌盛生物痒，在民间保肝应用历史悠久，尚可应用于治肠炎腹泻，痢疾，技术有限责任公司，Sigma进口分装，I．ot：24H10131)，AIT、尿路感染，湿疹，痈疮肿毒等症。本课题组首次发现并证明了AST检测试剂盒(广州标佳科技有限公司)。TNF、IFN检测红背叶根对CC复合因素及酒精性肝纤维化大鼠均有保肝、降试剂盒(联科生物技术有限公司)，SOD检测试剂盒(南京建成酶

4、、抗肝纤维化的作用l】]，并能显著降低肝纤维化大鼠全血生物工程研究所，批号：20130913)，MDA检测试剂盒(南京建黏度指数，改善循环_3]。对卡介苗和脂多糖诱导的小鼠免疫成生物工程研究所，批号：20130911)；BCA蛋白测定试剂盒(北性肝损伤具有显著的保护作用L4]。临床实验表明其具有缓解京鼎国昌盛生物技术有限责任公司，Lot：38400150)。主要仪乙肝患者症状、改善肝功能、抗乙肝病毒功效l_5]。进一步研究器：模块化生物免疫分析仪(南方医科大学中西医结合医院检表明。红背叶根水提物、醇提物及总生物碱对CC14所致小鼠急验科，规格型号：

5、Cobas6000)；DK一8AD型电热恒温水槽(上海一性肝损伤均有一定的保护作用]。现我们将进一步对红背叶恒科技有限公司)；OlympusBH·2型显微镜(日本Olym—根4种不同提取物对急性肝损伤的治疗作用做初步研究，以明pus)；PM一20型显微摄像系统(日本Olympus)；离心机(Ther—确其4种不同提取物治疗急性肝损伤的效果，筛选出有效部mo)，酶标仪(Thermo)。位，并初步推断其抗肝损伤的机理，为更好地指导临床用药提1．2实验方法1．2．1动物造模、分组：适应性饲养3d供实验依据。后，随机抽取1O只作为正常组，余小鼠予尾静脉注射

6、Con溶1材料与方法1．1材料1．1．1实验动物：SPF级液(无菌生理盐水配制：1．5mg／mI，注射剂量：15mg／kg)，正常NIH小鼠，体重18-22g，170只，雄性(广东省实验动物中心提组注射等量无菌生理盐水。8h后剔除死亡小鼠，将造模小鼠供，动物许可证号：SCXK(粤)2008～0002，合格证号：随机均分成Con—A模型组、对照药甘利欣组及红背叶根原药水44007200003963。实验期间的颗粒饲料由南方医科大学实验提物高、中、低剂量组(简称原高、原中、原低组)，石油醚提取物动物中心提供。实验环境：动物房保持通风、干燥、室温22～高

7、、中、低剂量组(简称醚高、醚中、醚低组)，乙酸乙酯提取物25℃，湿度5O～70，自由饮水，鼠料定量饲养。高、中、低剂量组(简称酯高、酯中、酯低组)，正丁醇提取物高、1．1．2药物：红背叶根采自广东惠州，经南方医科大学中中、低剂量组(简称醇高、醇中、醇低组)。本实验共15组，每组药鉴定与药用植物教研室鉴定为大戟科植物红背山麻杆的根。10只，标号1-10号。红背叶根4种不同提取物：原药水提物、石油醚提取物、乙酸乙1．2．2分组后处理：分组后，将红背叶根4种不同提取物分酯提取物、正丁醇提取物，由南方医科大学中医药学院药剂室别按药效学原则，以3．9g生药／

8、kg，7．8g生药／kg，15．6g生药提供，均分高、中、低剂量组，按药效学原则与蒸馏水混合制成为低、中、高剂量灌胃给药，