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《均匀设计法优化廉价型牛凝乳酶工程菌发酵培养基》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、2582011,Vol.32,No.07食品科学※生物工程均匀设计法优化廉价型牛凝乳酶工程菌发酵培养基袁伟1,2，惠丰立2,*，柯涛2，程民杰2，赵金梅2(1.河南师范大学生命科学学院，河南新乡453007；2.南阳师范学院生命科学与技术学院，河南南阳473061)摘要：为了获得生产用廉价型牛凝乳酶工程菌发酵培养基，通过单因素试验考察发酵培养基中各组分对产酶的影响。结果显示：葡萄糖、玉米浆、酵母提取物、尿素质量浓度对产酶影响显著。以上述因素作为随机因子，进行均匀设计试验，采用逐步回归方法对试验结果进行分析。结果表明：在葡萄糖45g/L、玉米浆17g/L、酵母提取物6g/L、尿素12g/L的
2、条件下，凝乳酶活性达342.86SU/mL，比优化前提高了1.22倍。所得培养基为重组牛凝乳酶的高效低成本生产提供了参考。关键词：凝乳酶；工程菌；均匀设计；培养基OptimizationofFermentationMediumforGeneticallyEngineeredChymosinStrainbyUniformDesignMethodologyYUANWei1,2，HUIFeng-li2,*，KETao2，CHENGMin-jie2，ZHAOJin-mei2(1.CollegeofLifeScience,HenanNormalUniversity,Xinxiang453007,Ch
3、ina；2.CollegeofLifeScienceandTechnology,NanyangNormalUniversity,Nanyang473061,China)Abstract：Inordertoobtainalow-costfermentationmediumforrecombinantchymosinstrainChy1inalargescale,theeffectsofglucose,cornsyrup,yeastextractandureaconcentrationonchymosinproductionbyrecombinantchymosinstrainChy1were
4、exploredbysinglefactortests.Theresultsindicatedthattheeffectsofglucose,cornsyrup,ureaandyeastextractonchymosinproductionweresignificant.Theoptimalfermentationmediumwasoptimizedbyuniformdesignteststobeglucoseof45g/L,cornsyrupof17g/L,yeastextractof6g/Landureaof12g/L.Undertheseoptimalconditions,theac
5、tivityofchymosincanreachupto342.86SU/mL,whichexhibiteda1.22foldenhancementwhencomparedwithoriginalmedium.ThisoptimalfermentationmediumprovidedabasisformassivechymosinproductionbyrecombinantchymosinstrainChy1withhighefficiencyandlowcost.Keywords：chymosin；recombinantstrain；uniformdesignmethodology；l
6、ow-costmedium中图分类号：Q949.9文献标识码：A文章编号：1002-6630(2011)07-0258-04凝乳酶是从未断奶的小牛皱胃中提取的一种天冬氨度的凝乳酶，生产成本低，来源稳定[3]。目前全世界酸蛋白酶，它可以特异性裂解牛乳中的κ-酪蛋白的用于干酪生产的凝乳酶约50%以上是生物工程酶制剂，Phe105-Met106之间肽键，导致牛乳凝结，因此被广泛生物工程凝乳酶也得到了消费者的广泛接受[4-9]。我国尚用于干酪制造业[1-2]。凝乳酶是世界第二大酶制剂，其无凝乳酶生物工程产品的生产，除少量从小牛皱胃中提产量占全世界酶制剂总量的15%[3]。传统的凝乳酶是通取外，干酪
7、生产所用凝乳酶主要依赖进口。凝乳酶匮过宰杀未断奶小牛，从其皱胃中提取的。随着小牛数缺已成为制约我国干酪生产的重要因素。量的逐年减少，这种传统而昂贵的制备方法已无法满足本实验室已成功将小牛凝乳酶原基因与乳酸克鲁维世界干酪需求量不断增长的需要。酵母表达载体pKLAC1相连接形成重组质粒pKLAC1-利用微生物生物工程技术生产凝乳酶可以获得高纯Prochy，并将其转化至非营养缺陷型工业菌株乳酸克鲁收稿日期：2010-07-03
