棉花转基因材料的获得及主要农艺性状变异分析

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1、棉花学报CottonScience2009,21(1):23~27棉花转基因材料的获得及主要农艺性状变异分析*刘方,王坤波,宋国立,黎绍惠,王春英,张香娣,王玉红,胡育昌(中国农业科学院棉花研究所,农业部棉花遗传改良重点开放实验室,河南安阳455000)摘要:利用不同棉花受体材料进行花粉管通道法遗传转化研究。通过卡那霉素鉴定、抗虫性鉴定和PCR分子生物学鉴定,证明已成功将Bt基因转化到泗棉3号、辽棉15、中棉所19、中棉所29母本、中棉所35、中棉所36等棉花材料中。通过对转基因材料后代与非转基因材料的铃重、衣

2、分和纤维品质等差异分析,发现花粉管通道转基因后代材料存在广泛的变异。关键词:棉花;花粉管通道;转基因;遗传变异中图分类号:S562.032文献标识码:A文章编号:1002-7807(2009)01-0023-05VariationsofMainAgronomicTraitsinTransgenicCotton(Gossypiumhirsu-tumL.)Lines*LIUFang,WANGKun-bo,SONGGuo-li,LIShao-hui,WANGChun-ying,ZHANGXiang-di,WANGYu

3、-hong,HUYu-chang(CottonResearchInstitute,CAAS,KeyLaboratoryofCottonGeneticImprovement,MOA,Anyang,Henan455000,China)Abstract:Differentcottonlineshavebeenstudiedininheritancetraitschangingbypollentransgenicmethod.BtgenehasbeensuccessfullytransformedintoSimian3

4、,Liaomian15,CCRI19,CCRI29,CCRI35andCCRI36cottonvarietiesbypollentransgenicmethodwhichwascorrespondinglycon-firmedbykanamysinjudging,insect-resistancedetecting,PCRverifyingandsouthernbloting.TheSASanalysesindicatedthatpollentransgeniccottonhadlargechangingini

5、nheritancecharacteristicswiththebollweight,ginningoutturnandfiberqualities.Keywords:cotton;pollen-tubepathway;transgenic;geneticvariation[11-12]利用授粉后形成的花粉管通道将外源DNA等遗传基础的改变,表现出许多表型和农艺[13-16]导入植物胚囊的转化技术称为花粉管通道转化性状的改变,对转基因变异的研究具有非常[1-3]法。1981年黄骏麒等首次用此法将海岛棉重要的理论

6、和现实意义。通过多年的研究,利用[4-5]海南冬季棉花生育特点,利用花粉管通道与农杆DNA导入陆地棉引起性状变异。1991年谢道昕等用此法将目的基因)))苏云金芽孢杆菌杀菌介导转化方法获得了大批的转基因变异材料,[6]并且在田间农艺性状表现已经稳定。本试验通过虫蛋白基因导入棉花获得转基因植株。与农杆对这些转基因材料的验证和部分变异性进行研菌介导法相比,花粉管通道法有效避开了植株再究,在对花粉管通道转基因材料进行系统总结的生的难题,转化不受基因型控制,操作简单,转化同时,试图找出类似突变体并对其进行全面系统成本低

7、廉,提供了创造新种质、拓宽基因库的崭新[7-10]的调查,为突变体的确定和功能基因的研究提供技术途径。一定的理论基础。转基因植株在抗虫的同时,伴随着细胞遗传收稿日期:2008-03-28作者简介:刘方(1972-),男,副研究员,liufang@cricaas.com.cn;*通讯作者,wkbcri@cricaas.com.cn/wkbcri@hotmail.com基金项目:/9730计划(2004CB117306),/十一五0国家科技支撑计划(2006BAD13B04-1-09)24棉花学报21卷1材料和方法

8、1.2外源基因与菌株1.1受体材料选择标记基因为NPTII,目的基因Bt为选取生产上较成熟的棉花品种泗棉3号、辽CRYIA,基因由华中农业大学作物遗传改良国家棉15、中棉所19、中棉所29母本、中棉所35、中重点实验室张启发教授提供。基因表达载体棉所36和优良品系8101。通过花粉管通道法转PBI121的T-DNA区结构图如下:化外源基因。图1抗虫基因表达载体pBI121的T-DNA区

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